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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8ºC保存,不可冷冻!
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
Hieff Trans Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
0.5mL
产品描述
Hieff Trans® 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂是一种阳离子脂质体转染试剂,经优化专门用于悬浮细胞的转染,且适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染,对大多数真核细胞具有很高的转染效率。
Hieff Trans® 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂以无菌的液体形式提供。

运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!
注意事项
1. 为得到良好的转染效率,请先用无血清培养基(如OPTI-MEM I培养基)稀释Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent(以下简称Hieff Trans®),之后与DNA或RNA做混合。
2. 使用高质量的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率,务必确保质粒的高纯度和无菌状态,彻底去除质粒提取过程中可能残留的苯酚和高盐,因为上述酚类会对细胞造成损失,而高盐分会干扰“Hieff Trans®-复合物”的形成。质粒中的内毒素也是转染的大敌,务必去除。
3. 转染时培养基中不能添加抗生素。
4. 阳离子脂质体应该在2-8℃保存,要注意避免多次反复长时间开盖,因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。
5. 需优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA和Hieff Trans®的比例,通常推荐是1:2 或1:3
推荐转染条件(以293悬浮培养细胞,质粒DNA转染为例)
最终转染体积:30 mL
转染细胞数目:3×107 cell(最终细胞密度:1×106 cell/mL),转染之前需要确保细胞健康,细胞活力>90%。
质粒DNA量:20–40 μg (typically use 30 μg)
转染试剂量:40–80 μL (typically use 60 μL). Use 2 μL Hieff Trans® per 1 μg of plasmid DNA transfected.
操作步骤(293悬浮细胞)
使用以下步骤在30 mL总体系内转染293细胞,转染过程中生长培养基内不要添加抗生素,否则会降低转染效率。转染过程请同时设置阳性对照组和阴性对照组(无DNA,无Hieff Trans®)。
【注】对于其他的培养总体系,按比例放大或者缩小各组分用量。
1. 转染当天,在配制复合物之前,准备转染需要的细胞量【见上推荐转染条件,即28 mL 生长培养基内加入3×107 cell,台盼蓝排斥法确定细胞活力和小量细胞成团量。剧烈漩涡混匀45 s以打破细胞团,并用计数器测定总细胞量。细胞活力需>90%。】【注】:为了达到良好效率,确保单细胞悬液。
2. 按照以下方法配制Hieff Trans®-DNA复合物,
a, 用无血清培养基(如OPTI-MEM I)稀释30 μg质粒DNA,使其终体积为1 mL;
b, 用无血清培养基(如OPTI-MEM I)稀释60 μL Hieff Trans®,使其终体积为1 mL;轻轻混匀,于室温孵育5 min;【注意】:过长时间孵育会降低效率。
c, 孵育5 min之后,将稀释的质粒DNA加入稀释的Hieff Trans®,使其总体积为2 mL。轻轻混匀。
d, 室温孵育20-30 min,使得DNA-Hieff Trans®复合物形成。此时溶液可能会混浊,但不会影响转染。
【注意】:DNA-脂质体复合物室温至少稳定保存5 h。
3. 孵育完全后,将2 mL DNA-Hieff Trans®复合物加入28mL 含293悬浮细胞的生长培养基内,使得细胞最终的密度约为1×106 cell/mL。对于阴性对照,用2 mL无血清培养基(如OPTI-MEM I)替换。
4. 37℃,8% CO2轨道摇床培养,转速125 rpm,直至进行转基因表达分析,无需去掉复合物或更换培养基。然而,可能有必要在4-6 h后更换生长培养基,不会降低转染活性。
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格元 | 促销价元 |
| 40801ES04 | HG_TransGeneTM tranfection reagent | 1.5ml | 3000.00 | / |
| 40802ES01 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 100μl | 168.00 | 118.00 |
| 40802ES02 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 0.5ml | 738.00 | 488.00 |
| 40802ES03 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 1.0ml | 1308.00 | 868.00 |
| 40802ES08 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 5×1ml | 4878.00 | 3248.00 |
| 40803ES70 | Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂 | 200T | 298.00 | / |
| 40804ES76 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml) | 500μl | 180.00 | / |
| 40804ES86 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml) | 5×500μl | 500.00 | / |
| 40805ES01 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 100ul | 228.00 | 178.00 |
| 40805ES02 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 0.5ml | 948.00 | 598.00 |
| 40805ES03 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 1.0ml | 1678.00 | 998.00 |
| 40805ES08 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 5×1ml | 5268.00 | 3698.00 |
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文献和实验Attractene Transfection Reagent 高效转染各种贴壁真核细胞 QIAGEN推出新一代转染试剂,并正在推广。现在还可以申请免费试用。 该产品有以下特点: ♦ 高效DNA转染,极低细胞毒性 ♦ 快速、简便的操作流程 ♦ 所有贴壁细胞 (包括难转细胞)的最佳选择 ♦ 非常适用于瞬时转染,稳定转染,共转染和 shRNA载体转染 ♦ 不含来自动物的组分 更高效率转染质粒DNA Attractene 试剂采用非脂质体的新一代脂质分子技术,能对所有贴壁
的转染费用少于 5 元。5. 创新型细胞转染试剂 ViromerViromer 是利用病毒融合机制(因此得名)可以将 plasmid 和 siRNA 等外源核酸转染到目的细胞中的一项突破性技术。ü 超高的转染效率,体内降解能力强,能最大的提高转染效率降背景。ü 使用简单,不需要去除血清和抗生素ü 无脂质成分,不参与细胞内代谢ü 反向转染,适用于高通量筛选ü 适用于难转染的细胞-原代细胞-分化细胞和干细胞-悬浮细胞Viromer Red (DNA Transfection), RAW 264.76
Invitrogen的王牌:Lipofectamine 2000转染试剂
的。 注意事项 Lipofectamine 2000要求细胞铺板密度较高,以90%-95%为佳,这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响。Lipofectamine 2000可用于有血清培养基的转染,并且转染前后不需要换培养基,使得操作方便了许多,但是要注意制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂,因为血清会影响复合物的形成。复合物形成后是可以加入血清。这里要特别注意检测所用的无血清培养基是否能和Lipofectamine 2000匹配,比如已知CD293, SFM II, VP











