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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至-80℃
- 克隆性:
见说明书
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Rattus norvegicus (Rat)
- 宿主:
Mouse小鼠,Human人,Rat大鼠、、、、、
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
500ug/ml
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Topoisomerase II (TOP2)
- 抗体名:
拓扑异构酶Ⅱ(TOP2)单克隆抗体
- 规格:
200ug/200ug
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ug | 产品价格: | 询价 |
www.klbscience.com
单克隆抗体制备的基本过程如下:
(1)用抗原免疫小鼠;
(2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
(3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
(4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
(5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后,一般有两种方法来获得单克隆抗体:小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
(1)小鼠腹水:
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔,杂交瘤在腹腔内增殖,取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作,重复性高,且花费少,得到的抗体量多,但伤害动物,而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
(2)细胞培养:
将杂交瘤细胞进行培养,培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多,因为细胞上清含有培养液,pH指示剂,细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确,可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之,单克隆抗体的高特异性,重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而,要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件,否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验,如区分人体内的内源性 促红细胞生成素(EPO)和摄入性EPO,必须采用高特异性的单克隆 抗体予以鉴别。 3畅单克隆抗体在酶免疫分析中的应用 细胞因子在免疫调节过程中扮演重要角色,由辣根过氧化物 酶标记的抗细胞因子单克隆抗体等 试剂 所建立的夹心ELISA 方法,可检测人体体液中绝大部分微量存在 的细胞因子,对评价细胞因子参与免疫调节和免疫病理过程具有重要意义。McAb 还能用于微生物的鉴 别,应用McAb 不仅能鉴别不同的病原体,还能鉴别相同病原体不同的种、型、亚型以及不同
基和下游工艺的相关杂质,采用适当的技术和方法进行分析检测。 六、经修饰的单克隆抗体 为了提高单克隆抗体在治疗和体内诊断中的作用,常用单抗与毒素、药物、放射性核素或其它物质偶连形成免疫结合物,或在同一段多胎链包含非免疫球蛋白和免疫球蛋白序列的嵌合重组蛋白来获得。研究者除对前面提到的有关未偶连单克隆 抗体(未修饰单克隆 抗体)的要求外,还应提供下列内容: (一)免疫结合物的构建 应提供构建免疫结合物所用试剂和过程的详细资料,包括: 1、描述与单克隆抗体连接的成分如:毒素、药物、酶及细胞因子,包括
1.烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在56~60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为2~6小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化,因此高温烤片对抗原有破坏作用。 2.脱蜡和水化 分别在二甲苯Ⅰ、Ⅱ中浸泡15~30分钟,以脱掉组织中的蜡。但是,进人组织中的二甲苯不能与水溶性染色液相溶,故需进一步通过下行梯度乙醇把组织中的二甲苯逐步替代出来。切片在100%乙醇工、Ⅱ中分别浸泡
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