单克隆抗体在检测中的应用
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荧光素标记的单克隆抗体还可用于对生物活性分子细胞内示踪。核转录因子NF -κB 在非转录状态 时位于胞质内,当激活时可进入细胞核,调节相关基因的转录。采用荧光标记的特异性抗体可对NF -κB 进行细胞内定位,从而了解细胞的状态。
抑癌基因表达的p53 蛋白与细胞周期调节及细胞凋亡有关,通常 其在细胞内的半衰期很短,常规方法难以检测。当发生突变时,则半衰期延长,引起在细胞内聚集,采用荧 光标记的特异性抗体,可检测细胞内p53 蛋白聚集状况。
2畅单克隆抗体在放射免疫分析中的应用 1959 年,Yalow 等建立的放射免疫分析法(RIA),是超微量 分析史上的一次突破。其原理是用放射性核素标记抗原(图22 -5),与被测抗原竞争相应的抗体,核素标记的抗原抗体复合物越多,则被测抗原越少,反之亦然。
McAb 问 世以来,因其可大批量生产,并且具有高度特异性和均一性,使放射 免疫检测的实验结果准确度更高,重复性更好。在研究激素与内分 泌疾病的关系、诊断内分泌疾病及评判治疗效果等方面具有重要意 义。
单克隆抗体还应用于兴奋剂检测之中,如区分人体内的内源性 促红细胞生成素(EPO)和摄入性EPO,必须采用高特异性的单克隆 抗体予以鉴别。
3畅单克隆抗体在酶免疫分析中的应用 细胞因子在免疫调节过程中扮演重要角色,由辣根过氧化物 酶标记的抗细胞因子单克隆抗体等 试剂 所建立的夹心ELISA 方法,可检测人体体液中绝大部分微量存在 的细胞因子,对评价细胞因子参与免疫调节和免疫病理过程具有重要意义。
McAb 还能用于微生物的鉴 别,应用McAb 不仅能鉴别不同的病原体,还能鉴别相同病原体不同的种、型、亚型以及不同生活周期的抗 原性变化。流感病毒经常发生变异,由此引起反复流行。单克隆抗体可分辨流感病毒微小变异,对流感快 速诊断,流行预测和疫苗的制备具有重要意义。
3畅单克隆抗体在酶免疫分析中的应用 细胞因子在免疫调节过程中扮演重要角色,由辣根过氧化物 酶标记的抗细胞因子单克隆抗体等 试剂 所建立的夹心ELISA 方法,可检测人体体液中绝大部分微量存在的细胞因子,对评价细胞因子参与免疫调节和免疫病理过程具有重要意义。
McAb 还能用于微 生物 的鉴 别,应用McAb 不仅能鉴别不同的病原体,还能鉴别相同病原体不同的种、型、亚型以及不同生活周期的抗 原性变化。流感病毒经常发生变异,由此引起反复流行。单克隆 抗体 可分辨流感病毒微小变异,对流感快 速诊断,流行预测和疫苗的制备具有重要意义。
4畅单克隆 抗体 在定位检测中的应用 放射性核素99m Tc 等标记单克隆抗体,通过静脉、腹腔或腰椎穿 刺等方式进入机体后,可特异性地与靶抗原结合,显示抗原分子和组织细胞的机能状态。这种检测方法称 为功能显像,又称为放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ)。
RⅡ可进行肿瘤的分类和鉴别诊断,可确 定肿瘤的原发病灶及转移部位,并可确定肿瘤大小。RⅡ还可用于心肌坏死病灶的定位测定、血栓的定位 测定以及炎症病灶的探测。
4畅单克隆抗体在定位检测中的应用 放射性核素99m Tc 等标记单克隆抗体,通过静脉、腹腔或腰椎穿 刺等方式进入机体后,可特异性地与靶抗原结合,显示抗原分子和组织细胞的机能状态。这种检测方法称 为功能显像,又称为放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ)。
RⅡ可进行肿瘤的分类和鉴别诊断,可确 定肿瘤的原发病灶及转移部位,并可确定肿瘤大小。RⅡ还可用于心肌坏死病灶的定位测定、血栓的定位 测定以及炎症病灶的探测。