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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃避光及-20℃及4℃
- 供应商：
万类生物
- 规格：
48T
产品名称：乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒（微量酶标法）（试用装10T）
产品概述：
乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase , LDH）是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损 , LDH即被释放到细胞外，通过检测细胞培养上清中LDH活性，可判断细胞受损程度，在一些应用中，比如药物筛选时，需要进行特定物质细胞毒性检测。LDH能催化乳酸生成Pyruvic acid，Pyruvic acid与2,4-Dinitrophenylhydrazine反应生成Pyruvic acid2， 4-Dinitrophenylhydrazone , 在碱性溶液中呈棕红色 , 通过比色可求出酶活力。 本试剂盒可测各种组织、血清（浆）及培养细胞、培养上清液、脑脊液等样本中LDH活性。
包装信息：
保存条件：4℃；-20℃；避光；本试剂盒自粉剂溶解之日起3月内有效
该产品被引用文献：
1、Bai Y; Yang Y; Cui B, et al., Temporal effect of melatonin posttreatment on anoxia/reoxygenation injury in H9c2 cells. Cell Biol Int 2022.
PubMed: 34989460
2、Zeng L; Li A; Zhang Z, et al., Ropivacaine Induces Cell Cycle Arrest in the G0/G1 Phase and Apoptosis of PC12 Cells via Inhibiting Mitochondrial STAT3 Translocation. Inflammation 2021, 44 (6), 2362-2376.
PubMed: 34417665
3、Chen H; Lin H; Dong B, et al., Hydrogen alleviates cell damage and acute lung injury in sepsis via PINK1/Parkin-mediated mitophagy. Inflamm Res 2021, 70 (8), 915-930.
PubMed: 34244821
4、Huang W; Qu M; Li L, et al., SiRNA in MSC-derived exosomes silences CTGF gene for locomotor recovery in spinal cord injury rats. Stem Cell Res Ther 2021, 12 (1), 334.
PubMed: 34112262
5、Liu Z; Xia X; Lv X, et al., Iron-bearing nanoparticles trigger human umbilical vein endothelial cells ferroptotic responses by promoting intracellular iron level. Environ Pollut 2021, 287, 117345.
PubMed: 34004477
1. 试剂配制 :
（1）辅酶Ⅰ应用液的配制：每支粉剂加1.3ml双蒸水溶解，溶解后即为10x辅酶Ⅰ储备液，如需多次使用建议分装冷冻，防止反复冻融。测定时将10x辅酶Ⅰ储备液用双蒸水10倍稀释 , 用多少配多少 , 现用现配。
（2）0.4mol/L NaOH 溶液配制 : 将4mol/L NaOH 溶液用双蒸水10倍稀释 , 用多少配多少 , 现用现配。
（3）0.2μmol/mL C3H3NaO3 标准应用液配制：取2μmol/mLC3H3NaO3标准液用双蒸水10倍稀释 , 现用现配。
2. 参考取样量：
0.01%小鼠脑组织匀浆取5-20μL（根据样本活力高低确定取样量），人血清10倍稀释取10-30μL（根据样本活力高低确定取样量）, 细胞用PBS裂解 , 细胞培养基可直接用于测定。若样本中LDH酶活力太高，可将样本用生理盐水稀释后再测。
3. 计算公式：
（1）血清（浆）LDH计算公式：
单位定义：1000ml 血清（浆）37℃与基质作用15min，在反应体系中产生1μmol Pyruvic acid为1单位。
（2）组织LDH活力计算公式：
单位定义：每克组织蛋白37℃与基质作用15min，在反应体系中产生1μmol Pyruvic acid为1单位。
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文献和实验PubMed: 34989460
2、Zeng L; Li A; Zhang Z, et al., Ropivacaine Induces Cell Cycle Arrest in the G0/G1 Phase and Apoptosis of PC12 Cells via Inhibiting Mitochondrial STAT3 Translocation. Inflammation 2021, 44 (6), 2362-2376.
PubMed: 34417665
3、Chen H; Lin H; Dong B, et al., Hydrogen alleviates cell damage and acute lung injury in sepsis via PINK1/Parkin-mediated mitophagy. Inflamm Res 2021, 70 (8), 915-930.
PubMed: 34244821
4、Huang W; Qu M; Li L, et al., SiRNA in MSC-derived exosomes silences CTGF gene for locomotor recovery in spinal cord injury rats. Stem Cell Res Ther 2021, 12 (1), 334.
PubMed: 34112262
5、Liu Z; Xia X; Lv X, et al., Iron-bearing nanoparticles trigger human umbilical vein endothelial cells ferroptotic responses by promoting intracellular iron level. Environ Pollut 2021, 287, 117345.
PubMed: 34004477
的 LDH 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 乳酸脱氢酶（ LDH ） 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中 大鼠 乳酸脱氢酶（ LDH ） 浓度。 试剂盒组成 ： 试剂盒组成 48
细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测，常用的实验技术有后两种。NK细胞（natural killer cell）是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞，可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）则是特异免疫系统发挥特异杀伤作用的效应细胞，可特异杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞。本节介绍乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性、Calcein释放实验检测CTL活性
乳酸脱氢酶释放试验测定NK细胞活性 【基本原理】 乳酸脱氢酶（LDH）是活细胞胞浆内含酶之一，在正常情况下，不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时，细胞膜通透性改变，LDH可释放至介质中.释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中，使氧化型辅酶I（NAD+ ）变成还原型辅酶I（NADH2 ），后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化氮唑蓝（INT）或硝基氯化四氮唑蓝（NBT）形成有色的甲 类化合物，在490nm
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