
精确分子量测定
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- 2025年07月15日
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精确分子量测定
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基云(上海)生物技术有限公司
ESI技术是将待测分子溶解在溶剂中通过HPLC分离,以液相方式通过毛细管达到喷雾口,在喷雾口高压电场作用下形成带电荷的微滴,随着微滴中的挥发性溶剂蒸发,微滴表 面的电荷体密度随半径减少而增加,达到某一临界点时,样品以离子化的方式从液滴表面蒸发,进入质谱。
电喷雾离子化方式容易形成多电荷离子,因此在较小的M/Z范围内可检测到大分子质量的分子。对ESI测得的数据进行去卷积(Deconvolution)即可得到蛋白质精确分子量。
应用领域
纯化蛋白分子量测定
抗体分子量测定
蛋白药物分子量测定
案例分析
送样须知
蛋白样品最好为纯化后干粉状产品,尽量不含盐类及其他质谱不兼容物质,
溶液状样品,浓度应在1mg/ml以上,体系不含SDS,甘油等质谱不兼容物质,
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一、实验目的 1. 了解凝胶层析的原理及其应用。 2. 通过测定蛋白质分子量的训练,初步掌握凝胶层析技术。 二、实验原理 凝胶层析又称排阻层析,凝胶过滤,渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等,而测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。凝胶是一种具有立体网状结构且呈多孔的不溶性珠状颗粒物质。用它来分离物质,主要是根据多孔凝胶
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