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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
FIP293细胞,ATCC细胞复苏操作要点:
1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,避免引起污染。
3、用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4、800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5、将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6、第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
FIP293细胞,ATCC细胞运输方式:活细胞;生长状态:贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮;细胞形态:上皮样;规格:1000000个/瓶;细胞传代:1:4传代;细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌;细胞用途:FIP293细胞,ATCC细胞只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
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文献和实验细胞名称 293 和 293T种属人组织来源 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜的)蛋白的便捷方式。形态特点 上皮细胞致瘤性 +产物或抗原 大T抗原染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞
1-2ml消化液室温或37℃消化。加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。293T:生长快,通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶过度消化。每两到三天换液一次。7、冻存液:95%培养基;5%,DMSO;8、培养条件:ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清37℃培养.
相关专题 293细胞 人胚肾细胞系293是一种E1区缺陷互补细胞系。用磷酸钙共转染 法很容易使DNA进入细胞。悬浮的293细胞很容易大规模培养,但不容易长期保持稳定,应用时最好采用单层培养。 传达次数较少的单层培养293细胞是成功获得重组 病毒和病毒斑的关键。293细胞的培养质量特别是单层培养的品质情况是病毒斑形成的重要因素。也是重组子构建成功与否的关键。293细胞在传代120次以后,其生长状况不再完全是单层的了,偶尔会
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