转基因油菜定性检测试剂，B.rapa：B.napus阳性对照

盘点 PCR 的七大应用领域

转基因生物的等位基因分型。（A）可用针对目标区域的特异性PCR引物来检测基因位点是野生型序列（深灰色）还是转基因序列（黄色）。（B）如该凝胶照片所示，PCR 产物可用于确定基因型。在这些实验中，使用了野生型 (+/+)和转基因 (+/–和–/–) 小鼠的基因组 DNA。 但是如果为了检测特定核苷酸突变，则必须对扩增的序列进行进一步分析。例如， PCR 扩增子测序就是研究单核苷酸变异（SNVs）和单核苷酸多态性（SNP）的方法之一。强烈推荐使用高保真 DNA 聚合酶，以防止在 PCR 过程中引入多余

实验操作篇

，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

PCR扩增反应在食品转基因成分鉴定中的应用

的，为此政府已建立了检测食品中转基因成分的体制。其中，最重要的是转基因检测方法的可靠性和有效性。所以我们利用分子生物学技术建立起一套基于PCR反应的实验方案，用于食品质控实验室的工作。最要害的是第一步：DNA提取，我们做了很严格的监控 。我们依据植物基因组和质粒DNA的提取效率来选择DNA提取试剂盒。整个提取过程包括破坏细胞壁、去除RNA和利用沉淀去除蛋白质，然后将DNA吸附在层析柱上，经过洗涤后再洗脱下来。类似的方法已经用于从其他一些植物和病毒中提取DNA。PCR反应的过程分为三个阶段：(1)通过加热