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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2℃~8℃
- 保质期:
2年
- 英文名:
Recombinant Carboxypeptidase B
- 供应商:
上海雅心生物技术有限公司
- 库存:
大量
重组羧肽酶B(序列分析纯)
Cat.No.:SRCPB01
CAS: 9025-24-5
EC: 3.4.17.2
储存温度:2-8℃
来源:重组羧肽酶B,基因工程生产,大肠杆菌表达。
蛋白序列:氨基酸序列与大鼠胰腺羧肽酶完全一致。
1.产品简介
重组羧肽酶B专一水解蛋白质C-末端碱性氨基酸(赖氨酸、精氨酸、组氨酸),又称为肽酰-L-赖氨酸(L-精氨酸)水解酶;精蛋白酶。分子量为33.8kD,等电点为6.0,最适pH为7.0-9.0。活性受精氨酸、赖氨酸的竞争性抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
2.产品特性
| 来源 | 重组大肠杆菌 |
| 外观 | 白色、类白色粉末 |
| 比活(单位/mg 蛋白) | ≥ 200 |
| 蛋白电泳 | 单一主条带 |
| 电泳(分子量) | 33.8±3.4 kDa |
| 纯度(HPLC) | ≥ 95% |
3.推荐使用方法
使用纯水或10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解,使终浓度为1-10mg/ml,使用时酶量:目的蛋白=1:50-1:1000(w:w),最适酶切pH为7.0-9.0。
4.储存和运输稳定性
储存稳定性:重组羧肽酶B冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;使用纯水或10mM Tris-HCl溶解后储存于-20℃,避免反复冻融。
运输稳定性:蓝冰保温运输,活性稳定。
5.产品优势
序列分析纯蛋白酶:特异性高,稳定性好。
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产 品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉:易于储存和运输。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
6.产品用途
1)蛋白质C-末端碱性氨基酸如精氨酸、赖氨酸和组氨酸的测定。
2)抗体碱性峰的检测。
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文献和实验性 将纯的重组羧肽酶 B 用纯水溶解为 10 mg/ml,之后用以下缓冲液稀释使酶液的终浓度为 1 mg/mL,pH 分别为 3.0、4.0、5.0、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、10.0、11.0、12.0, 25℃ 孵育 12 h 后测活。 2、羧肽酶 B 的最适 pH 测定 rCPB 纯酶液浓度为 1 mg/mL, 在不同 pH 条件下的催化速率,底物浓度为 0.1 mM/L,pH
后,它既不会抑制酶体,也不再与之结合,这使得酶体能迅速发挥功能,并对前导肽 C-端的 Arg 进行切割。 (上面暗红色部分代表前肽,下面蓝色部分代表羧肽酶B,箭头所指为胰蛋白酶酶切激活位点)羧肽酶 B 的性质取重组羧肽酶 B 冻干粉。研究了重组羧肽酶 B 的最适 pH,最适温度,pH 稳定性及温度稳定性,对于 CPB 的使用起到指导作用。同时做了溶液的反复冻融稳定性,对于 CPB 酶液的储存和使用起到指导作用。 1、羧肽酶B 的 pH 稳定性 将纯的重组羧肽酶 B 用纯水
样品:重组胰蛋白酶,比活 4000USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适温度的研究 将底物 BAEE(0.25 mM)分别置于 4℃、15℃、20℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃ 和 70℃ 水浴中温浴 20 min,加入相同体积的 RPT 酶液测定 rPT 的活力,结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。 2. 温度稳定性的研究 取
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