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中乔新舟
1. 细胞水平(特别是原代细胞)基因沉默是针对客人需要,对感兴趣的基因在细胞水平进行沉默。
实验流程:设计目的基因的干扰片段、构建慢病毒干扰载体(根据需要选择Dox诱导干扰基因表达的载体系统)、病毒包装、以及含有目的基因干扰片段的病毒导入细胞等。 服务对象:针对所用哺乳动物细胞,特别适合于瞬时转染试剂转染效率低、毒性大的原代细胞基因操作。 服务方式:该服务包括了干扰片段设计、序列合成、载体构建、测序验证、病毒包装以及含有目的基因的病毒导入细胞等。
2 . 细胞水平(特别是原代细胞)基因过表达是针对客人需要的目的基因进行基因克隆、测序。可选择装载到逆转录病毒或慢病毒载体系统中,慢病毒载体系统可选择装载到dox诱导调控基因表达的系统。
服务对象:针对所用哺乳动物细胞,特别适合于瞬时转染试剂转染效率低、毒性大的原代细胞基因操作。 服务方式:该服务包括了基因克隆、载体构建、测序验证、病毒包装、以及含有目的基因的病毒导入细胞等。
延伸服务:
慢病毒介导的绿色荧光蛋白和萤火虫萤光素酶基因的永久性整合。
应用范围:适用于研究目的细胞被移植进实验动物以后,在动物体内不同位置的迁移,分布情况,从而实现移植细胞的追踪。特别是萤火虫萤光素酶标记的细胞,在小动物体内移植以后,可以利用小动物活体成像仪实现细胞移植后的活体细胞追踪。
服务方式:
(1)针对客户提供的细胞进行标记;
(2)针对客户需求,我们对原代细胞进行标记;
(3)直接提供可以标记细胞的慢病毒套装,客户根据使用说明对自己感兴趣的细胞进行标记。
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文献和实验1. 引言 转录后水平基因沉默(PTGS) ,又被称为 RNA 沉默,是指在植物中导入双链 RNA (dsRNA) 、外源基因或病毒而引起与之同源的植物基因下调表达。在 PTGS 过程中,目的基因能转录,但转录产物由于迅速被降解而不能积累 [1 , 2 ] 。RNA 干扰(RNAi ) 过程中 dsRNA 直接诱导与其同源的特异 mRNA 降解 [3~5 ] 。RNAi 的发现和对它的分子解析是现代科学史上最重要的技术突破之一。十几年前,在植物和真菌中,人们无意中发现 RNA 均能抑制
小pig 之前看到有这个课件,现在找不到了,有哪位大哥能再发一次,谢谢 freecell 本人孤陋寡闻,没有听说过“多基因沉默"这个概念;丁香园内搜索,也没有这个名词。不知“之前看到有这个课件"这个说法从何而来? 小pig 我已经找到了,是沉默染色体的传播的课件。我是在丁香园上面看到的,中文就是多基因沉默,但内容是染色体沉默的传播 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用
ono1180 求助各位同道: 我想过表达一个基因,想选用一个质粒载体连接此基因再转染入细胞,选用的载体需要有绿色荧光标记,而且能筛选出稳定转染的细胞系,上网查了一下觉得pEGFP系列的好像符合我的要求。 请问这个载体怎么样,大家还有什么载体觉得挺好,请指教,感谢了。 xiaokangkuaile 我用的是pEGFP-C1表达载体,但我的目的基因对GFP表达有影响,转染效果很差
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