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1 动物总蛋白提取
2 植物总蛋白提取
3 真菌总蛋白提取
4 细菌总蛋白提取
5 包涵体纯化
6 修饰蛋白纯化
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8 GST蛋白纯化
9 其他标签蛋白纯化
10 标签蛋白切割酶
11 蛋白浓度测定
13 蛋白酶抑制
14 蛋白样品污染清除
15 SDS-PAGE
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19 蛋白质分子量标准
20 蛋白质PAGE胶回收
21 PAGE胶染料
22 Western Blot
23 Western Blot AP检测
24 Western Blot HRP检测
25 Western Blot 胶体金检测
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文献和实验3 个目的条带,而第二张图 6 个目的条带全部可以看到。 而造成这样大反差的根本原因就在于 Marker 了。为什么会这样呢?有三个很重要的原因。 第一,选择的抗体不是单克隆抗体。 第二,该抗体和 Marker 的结合力太强了,远远超过了跟目的蛋白的结合力。 第三,我们使用的成像系统并不能像人一样识别哪些是目的条带,哪些是非目的条带,为了保证成像区域不至于过度曝光,成像系统会严格地控制曝光时间,在特定的曝光时间下,尽管成像区域没有因为过度曝光而导致影像失常,但信号相对较弱的目的条带却因为没有足够的曝光
寄生于Cyanophora和 Peliaina等淡水原生动物体内的蓝藻。每 1个原生动物个体可寄生一至数个,在动物分裂时,蓝藻也发生分裂。每个动物个体中分配的蓝色小体数目大体上保持恒定。寄生状态的蓝藻无细胞壁,在进化上与叶绿体的起源有关,而蓝色小体和眼虫藻( Euglena)那种原生动物的叶绿体间的类缘关系已作为问题而被提出。
相信很多人在做 Western blot 实验时,会遇到各式各样奇怪的现象,为了让大家少走弯路,下面就跟大家来分享一下实验过程中会出现哪些现象,是什么原因,如何来解决。以下列举的情况可都是我们的实验员在多次实验中所积累的真实经验,内容文字少,全是干货。1. 出现黑点或黑斑原因:试剂污染,抗体结合到封闭剂解决方法:使用新鲜配置的试剂;过滤封闭液;选用其他类型封闭液2. 条带中出现边缘规则的白圈原因:转膜时膜和胶中间有气泡,或抗体在膜上未均匀分散解决方法:制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡;使用摇床孵育
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