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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温保存
- 规格：
50T
产品名称：DNA凝胶回收试剂盒
产品概述：本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒，其采用了独特的融胶液，其溶胶能力很强，无需加热，在室温（15-25℃）条件下即可快速溶解凝胶。本试剂盒结合DNA制备膜技术 , 具有高效、快速、方便之特点，操作只需20min便 可 完 成 。 使 用 本 试 剂 盒 每 次 可 纯 化 得 到 多 至20µg以 上 的DNA片 段 （50bp-20kb）, 回 收 率 高 达50%-80% ,20bp-50bp的DNA片段回收率略低。经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高，完整性好，可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。
注意事项：
1. 使用前请确认洗涤液中是否加入指定体积的无水乙醇。
2. 切胶时切忌胶块过大，应尽量减小凝胶体积，否则会影响DNA收量。
3. DNA需长期保存时，建议在洗脱液中保存。
4. 纯化的DNA用于DNA序列分析时，最好使用灭菌水洗脱DNA。
该文献被引用文献（仅展示部分）：
Yang X; Zhang F; Liu X, et al., FOXO4 mediates resistance to oxidative stress in lens epithelial cells by modulating the TRIM25/Nrf2 signaling. Exp Cell Res 2022, 113340.
PubMed: 36075446
操作流程：
使用前准备事项
1. 首次使用前，向洗涤液中添加56ml（50T）的100%无水乙醇。
2. 检查融胶液是否透明，因为融胶液在低温状态下可能会出现沉淀，如果使用前出现沉淀，请于37°C加热至沉淀消失并恢 复至室温后使用。
操作方法
1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶，然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面的液体。胶块超过300mg时，请使用多个收集管进行回收，否则影响回收率。
3. 切碎胶块。胶块切碎后可以加快胶块溶解时间，提高DNA回收率。
4. 称量胶块重量，计算胶块体积。计算胶块体积时，以1mg=1µl进行计算。
5. 向胶块中加入胶块融胶液 , 融胶液的加量如下表：
| 凝胶浓度 | 1.0% | 1.0%-1.5% | 1.5%-2.0% |
| 融胶液使用量 | 3个凝胶体积量 | 4个凝胶体积量 | 5个凝胶体积量 |
7. 将试剂盒中的吸附柱安置于收集管上，并将步骤6的溶液转移至吸附柱中，12000rpm离心1min，弃滤液。（注：如将滤液再加入吸附柱中离心一次，可以提高DNA的回收率。）
8. 将700µl的洗涤液加入吸附柱中，放置1min后室温12000rpm离心30s，弃滤液。
9. 重复操作步骤8。
10. 将吸附柱安置于收集管上，室温12000rpm离心1min，并在超净台内吹干。
11. 将吸附柱安置于新的1.5ml的离心管上，在吸附柱膜的中央处加入30µl灭菌蒸馏水或洗脱液，室温静置1min。（注： 将灭菌蒸馏水或洗脱液加热至60°C使用时有利于提高洗脱效率。）
12. 室温12000rpm离心1min洗脱DNA。
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文献和实验PubMed: 36075446
2、Fan Y; Fan H; Li P, et al., Mitogen-activating protein kinase kinase kinase kinase-3, inhibited by Astragaloside IV through H3 lysine 4 monomethylation, promotes the progression of diabetic nephropathy by inducing apoptosis. Bioengineered 2022, 13 (5), 11517-11529.
PubMed: 35510516
不用试剂盒的凝胶回收（来自网络） 2008-01-09 15:41:32| 分类： 分子生物学实验室 | 标签： |字号大中小 订阅 . （1）用小针头在0.5ml离心管底部打洞，用玻璃棉塞住离心管底部。 （2）紫外透射检测仪下观察，用小刀片小心切出含有目的片段的凝胶。 （3）将凝胶条放入0.5ml离心管中，外套1.5ml离心管，8000rpm离心3分钟。用微量取液器吸取1.5ml离心管中的液体，转移到另一干净的1.5ml离心管中。然后重复离心，直到将凝胶条中的液体全部转移
1、在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量，该重量作为一个凝胶体积（如如100mg=100ul）。2、根据凝胶的浓度，加DE-A 液凝胶浓度 DE-A溶液体积≤1.0% 3个凝胶体积≤1.5% 4 个凝胶体积≤2.0% 5 个凝胶体积混匀后于75℃加热，（低熔点琼脂糖凝胶于45oC加热），间断混合，直到凝胶熔化（6-8分钟）。3、加
相关专题 用常规的凝胶回收试剂盒(Gel Extraction Kit)来回收琼脂 糖凝胶电泳里的DNA条带可谓最简便易行的实验室操作之一。只要割胶，加入溶胶Buffer保温溶胶，上柱离心，清洗一次，最后洗脱就可以了。不过如果实验偶尔需要跑聚丙烯酰胺PAGE胶，回收DNA可就麻烦多了。电洗脱?要多麻烦就有多麻烦，回收率还低----PAGE上样量本来就不能多加，否则分辨率会降低，量少再加上回收率低做起来就更加不划算。本来好几年前生物通就介绍过一个以色列
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