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无血清细胞冻存液
BAMBANKER™、BAMBANKER™ Direct

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GC Lymphotec开发的BAMBANKER™无血清细胞冻存液,不含血清,细胞不受血清来源的未知成分或感染物质影响,无成分组成导致的批间差,质量稳定。此外,BAMBANKER™ 具有与含血清型冻存液相同的高存活率,因此可放心使用。 仅需在培养悬液中添加等量的BAMBANKER™ Direct,无需通过离心回收细胞,即可快速冷冻(-80℃)并进行长期储存。数据显示,与离心法相比,使用BAMBANKER™ Direct的操作时间缩减约2/3。已确认其性能与畅销20多年的BAMBANKER™相同,可放心使用。 |
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◆特点
● 具有与含血清型冻存液相同的细胞存活率(已获得专利)
● 无需程序冷冻仪,可在-80℃快速冷冻且长期储存
● 拥有小鼠ES细胞的使用实绩1)
● BAMBANKER™ Direct可在直接添加至细胞培养液中后进行冻存,无需离心操作
用户报告
● 东京工业大学大学院 生命理工学研究科 田川研究室 佐藤老师
◆操作方法
BAMBANKER™
1. 离心对数生长期※的细胞,并收集5×105~1×107个细胞。
2. 将回收的细胞悬浮于1 mL的BAMBANKER™中,转移至冻存管,无需预冷,直接在-80℃下冷冻储存。-80℃下冷冻的细胞后续也可在
液氮中储存。
3. 解冻细胞时,请在恒温箱中迅速进行。
※ 冻存成功的关键在于细胞的状态。冻存的细胞处于生长对数期,对提高冷冻后的活细胞率至关重要。

BAMBANKER™ Direct
1. 向培养液中添加等量的BAMBANKER™ Direct※
2. 使用移液器吹打混匀培养基和BAMBANKER™ Direct。
3. 将BAMBANKER™ Direct混合溶液转移至冻存管,-80°C冷冻储存。
※贴壁细胞需去除培养上清,使用PBS清洗后,添加细胞分离液,在与分离液等量的BAMBANKER™ Direct中悬浮。

◆不同细胞的存活率比较
| 细胞名称 | 保存时间 | 存活率 | ||
| BAMBANKER™ | A公司含血清型 | A公司无血清型 | ||
| P3U1(小鼠骨髓瘤细胞系) | 12个月 | 95% | 95% | 70% |
| K562(人白血病细胞系) | 12个月 | 73% | 70% | 60% |
| 人胃上皮细胞 | 10个月 | 100% | 62% | 56% |
| 人γδT细胞 | 10个月 | 65% | 37% | 35% |
| Daudi(人B细胞系) | 12个月 | 100% | 100% | 92% |
| PC12(大鼠来源肾上腺嗜铬细胞瘤) | 11个月 | 95% | 59% | 20% |
| 人B细胞系 | 9个月 | 74% | 54% | 35% |
| OKT4(小鼠杂交瘤) | 12个月 | 100% | 100% | 92% |
| 猴B细胞系 | 10个月 | 56% | 40% | 18% |
※ 保存条件:-80℃
◆小鼠成纤维细胞系保存效率对比
【BAMBANKER™】vs【自制冷冻保存液】
labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/22.html(视频)
实验条件
● 使用细胞:小鼠成纤维细胞系
● 保存细胞数量:4 x 106 cells/ vial (各细胞悬浮于1 mL的保存液中)
● 储存温度:-80℃,放入直接保管箱中进行冷却
● 储存时间:45天;解冻方法:常规法进行解冻
在自制冻存液(含10%DMSO的FBS)中发现了大量的死亡细胞,增殖能力停滞。而在BAMBANKER™中,解冻后立即观察到了活跃的细胞增殖,证明大多数细胞成功存活。
数据提供:东京医科大学 生化学领域 森谷老师
◆BAMBANKER™应用实例细胞一览
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3T3‐L1(小鼠前脂肪细胞系) |
HepG2(人肝癌细胞系) |
P3U1(小鼠骨髓瘤细胞系) |
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A431(人鳞状细胞癌细胞系) |
HFF(人正常成纤维细胞系) |
PANC-1(人胰腺癌细胞系) |
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BAEC(牛主动脉内皮细胞系) |
Huh7(人类肝癌细胞系) |
PC12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤系) |
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Balb/3T3(小鼠成纤维细胞系) |
Jurkat(人白血病T细胞系) |
RPE(人间充质上皮细胞系) |
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C2C12(小鼠骨骼肌细胞系) |
K562(人慢性粒细胞白血病细胞系) |
SNL(小鼠胎儿成纤维细胞) |
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Daudi(人B细胞系) |
KATOIII(人胃癌上皮细胞系) |
TSU‐Pr1(人前列腺癌细胞系) |
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ECV304(人脐静脉内皮细胞系) |
KLM-1(人胰腺癌细胞系) |
Vero(非洲绿猴肾细胞系) |
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H295R(肾上腺皮质细胞) |
MDCK(犬肾小管上皮细胞系) |
人γδT细胞 |
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HEK293(人胚肾细胞系) |
MEF(小鼠胚胎成纤维细胞) |
人B细胞系猴B细胞系 |
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HEK293T(人胚肾细胞系) |
NIH3T3(胎鼠皮肤细胞系) |
人外周血来源活化淋巴细胞 |
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HeLa(人宫颈癌细胞系) |
OKT4(小鼠杂交瘤) |
永生化人肌肉细胞小鼠脾脏来源活化淋巴细胞 |
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HeLa S3(人宫颈癌细胞系) |
OP9(小鼠髓系基质细胞) |
小鼠ES细胞系 |
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 302-14686 | BAMBANKER BAMBANKER冻存液 | 100 mL |
| 306-14684 | 20 mLx5 | |
| 306-95921 | BAMBANKER Direct BAMBANKER直接冻存液 | 20 mL |
点击此处查看产品单页:BAMBANKER® 无血清细胞冻存液单页
Bambanker® 与其他相关产品的比较
细胞冻存效果验证
细胞冻存液类型
1.Bambanker®
2.Medium with serum (含血清,A公司)
3.Serum-free Medium (无血清,A公司)
实验结果
*1:细胞-80℃的保存时间

◆Q&A
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1. |
Q:为什么我使用了 BAMBANKER® 来保存细胞,但是存活率依然不高? A:请冻存前确保细胞处于生长对数期,并且冻存时细胞数目控制在 5×105~1×107/mL 冻存液。 |
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2. |
Q:我们实验室已经有固定的冻存程序了,换了你们的 BAMBANKER® 可以还继续用原来程序降温的方法冻存吗? A:虽然本产品可以无需程序降温冻存细胞,但如果通过程序降温盒等适当控制了温度下降的速度,效果更佳。 |
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3. |
Q:哪些细胞株(系)适合使用BAMBANKER® 来进行细胞冷冻保存? A:几乎所有细胞株(系)都可以使用 BAMBANKER® 进行冻存。对于较为宝贵的 ES/iPS 细胞的保存尤其适用。官网上所列举的细胞系均已经过测试验证。 但也并不排除可能有某些细胞株是不适合使用 BAMBANER® 来进行冻存的,用户在没有确认是否可使用时,建议在进行正式细胞冻存之前先进行预实验。 |
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4. |
Q:无血清冻存液相比传统含血清冻存液有什么优势? A:无血清冻存液因不含有动物血清,质量更稳定,批间差小;同时未知生物成分或感染性物质污染细胞的几率也极低,尤其对于 ES/iPS 细胞等有可能用于再生医疗的细胞安全得以严格保障;可以直接冻存无血清培养的细胞,免去无血清再驯化的步骤;另外 BAMBANKER® 无血清细胞冻存液不需要像传统的血清冻存液需要程序降温,减少了用户的繁琐操作,节省了时间。 |
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5. |
Q:BAMBANKER® 在冷冻保存细胞的过程中起什么作用? A:BAMBANKER® 无血清细胞冻存液使用了 DMSO 等作为保护剂,在冻存细胞时能以1℃/min 左右的温度下降而逐渐冻结,在此过程中,细胞内的水分子被置换成冻结保护剂,抑制胞内和细胞周边的冰晶的形成,防止细胞膜和细胞器结构损伤,防止蛋白变质。 |
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6. |
Q:未使用的BAMBANKER® 无血清细胞冻存液应该如何保存? A:2-10℃ 避光保存。开封后尽快使用。请注意保质期为自生产日期起 24 个月。 |
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7. |
Q:BAMBANKER® 能否使用于医疗领域? A:BAMBANKER® 仅供科研使用,不能使用于人体或医疗领域。 |
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文献和实验参考文献
1. T.Hikichi, et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 25, 46-53(2007)
2. Durruthy-Durruthy, J. et al. : Nature Genetics, 48, 44-52 (2016).
3. Sugii, S. et al. : Nature Protocols, 6, 346–358 (2011).
4. Zaidi, SK. et al. : Proc Natl Acad Sci U S A, 104, 19861–19866 (2007).
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-well blocks may be used with up to 4.8 or 2.4ml of media respectively. Cover each block with an AirPore™ (Qiagen Inc.) sheet and incubate at 370C with shaking at 325 RPM for approximately 20 hours. 2. Pellet cells by centrifugation for 20’ at 3,200 RPM
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