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无血清细胞冻存液
BAMBANKER™、BAMBANKER™ Direct

◆特点
● 具有与含血清型冻存液相同的细胞存活率(已获得专利)
● 无需程序冷冻仪,可在-80℃快速冷冻且长期储存
● 拥有小鼠ES细胞的使用实绩1)
● BAMBANKER™ Direct可在直接添加至细胞培养液中后进行冻存,无需离心操作
用户报告
● 东京医科大学 生化学领域 森古老师
● 东京工业大学大学院 生命理工学研究科 田川研究室 佐藤老师
◆操作方法
BAMBANKER™
1. 离心对数生长期※的细胞,并收集5×105~1×107个细胞。
2. 将回收的细胞悬浮于1 mL的BAMBANKER™中,转移至冻存管,无需预冷,直接在-80℃下冷冻储存。-80℃下冷冻的细胞后续也可在
液氮中储存。
3. 解冻细胞时,请在恒温箱中迅速进行。
※ 冻存成功的关键在于细胞的状态。冻存的细胞处于生长对数期,对提高冷冻后的活细胞率至关重要。

BAMBANKER™ Direct
1. 向培养液中添加等量的BAMBANKER™ Direct※
2. 使用移液器吹打混匀培养基和BAMBANKER™ Direct。
3. 将BAMBANKER™ Direct混合溶液转移至冻存管,-80°C冷冻储存。
※贴壁细胞需去除培养上清,使用PBS清洗后,添加细胞分离液,在与分离液等量的BAMBANKER™ Direct中悬浮。

◆不同细胞的存活率比较
※ 保存条件:-80℃
◆小鼠成纤维细胞系保存效率对比
实验条件
● 使用细胞:小鼠成纤维细胞系
● 保存细胞数量:4 x 106 cells/ vial (各细胞悬浮于1 mL的保存液中)
● 储存温度:-80℃,放入直接保管箱中进行冷却
● 储存时间:45天;解冻方法:常规法进行解冻
在自制冻存液(含10%DMSO的FBS)中发现了大量的死亡细胞,增殖能力停滞。而在BAMBANKER™中,解冻后立即观察到了活跃的细胞增殖,证明大多数细胞成功存活。
数据提供:东京医科大学 生化学领域 森谷老师
◆BAMBANKER™应用实例细胞一览
细胞系
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•201B7 (人iPS细胞系) |
•3T3-L1(小鼠前脂肪细胞系) |
•A431(人鳞状细胞癌细胞系) |
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•BAEC(牛主动脉内皮细胞系) |
•Balb/3T3(小鼠成纤维细胞系) |
•C2C12(小鼠骨骼肌细胞系) |
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•Daudi(人B细胞系) |
•ECV 304(人脐静脉内皮细胞系) |
•H295R(肾上腺皮质细胞) |
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•HEK293(人胚肾细胞系) |
•HEK293T(人胚肾细胞系) |
•HeLa(人宫颈癌细胞系) |
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•HeLa S3(人宫颈癌细胞系) |
•HepG2(人肝癌细胞系) |
•HFF(人正常成纤维细胞系) |
|
•Huh7(人肝癌细胞系) |
•Jurkat(人白血病T细胞系) |
•K562(人慢性粒细胞白血病细胞系) |
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•KATO III(人胃癌上皮细胞系) |
•KLM-1(人胰腺癌细胞系) |
•MDCK(犬肾小管上皮细胞系) |
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•DT40 (鸡B细胞来源) |
•NIH3T3(胎鼠皮肤细胞系) |
•OKT4(小鼠杂交瘤) |
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•OP9(小鼠髓系基质细胞) |
•P3U1(小鼠骨髓瘤细胞系) |
•PANC-1(人胰腺癌细胞系) |
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•PC12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤系) |
•RPE(人间充质上皮细胞系) |
•SNL(小鼠胎儿成纤维细胞) |
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•TSU-Pr1(人前列腺癌细胞系) |
•Vero(非洲绿猴肾细胞系) |
•小鼠ES细胞系 |
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•人永生化肌细胞 |
原代细胞
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•MEF(小鼠胚胎成纤维细胞) |
•人γδT细胞 |
•人外周血来源活化淋巴细胞 |
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•PBMC (外周血单核细胞) |
•小鼠脾脏来源活化淋巴细胞 |
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Bambanker® 与其他相关产品的比较
细胞冻存效果验证
细胞冻存液类型
1.Bambanker®
2.Medium with serum (含血清,A公司)
3.Serum-free Medium (无血清,A公司)
实验结果
*1:细胞-80℃的保存时间

Q&A

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文献和实验参考文献
1. T.Hikichi, et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 25, 46-53(2007)
2. Durruthy-Durruthy, J. et al. : Nature Genetics, 48, 44-52 (2016).
3. Sugii, S. et al. : Nature Protocols, 6, 346–358 (2011).
4. Zaidi, SK. et al. : Proc Natl Acad Sci U S A, 104, 19861–19866 (2007).
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