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文献和实验【求助】在转基因生物中，启动子区只要检测到甲基化就可以导致沉默吗？
guotao123 在转基因生物中，是不是只要在启动子区检测到发生了甲基化，就可以导致表达沉默吗？还是得甲基化到一定的程度才导致表达沉默？ slytjiaofei 这个不太好说，我想应该从以下两个方面考虑。第一，先看一下甲基化的程度怎样，网上有很多转录因子结合位点的预测软件，可以看看发生甲基化的部位是否在这些位点上或附近；第二，进行体外验证，可以利用甲基转移酶阴性的菌种构建含特定启动子序列的质粒载体，比较甲基化载体与非甲基化载体
基因表达调控的重点。现在的基因数据库信息丰富，拿到基因及其启动子序列非常简单。那么问题又来了，拿到启动子序列以后，下一步怎么找相关的调控蛋白/转录因子呢？生物信息学方法预测？你会得到很多可能的目标调控蛋白/转录因子，还要做实验一个一个验证。凝胶迁移（EMSA），染色质免疫共沉淀（ChIP）？只能针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子，而且还需要相应探针/抗体，对于大量筛选无能为力。美国Signosis的转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂可以方便、高效地解决这一问题。该方法专门用于筛查与特定DNA序列
以优化其 mRNA 结构，增加翻译效率 4、AAV（带荧光标记）体内感染后检测不到荧光或者荧光弱，可能是什么原因？ 可能的原因 解决方案 病毒滴度过低 重新测定病毒滴度 病毒失效 病毒颗粒在生产、保存或运输过程中可能受损，导致感染效率低或完全失效 检查病毒滴度；体外测试病毒的感染效果；重新包装病毒 对目标组织/细胞的感染效率低 选择组织/细胞特异性 AAV 血清型 荧光蛋白表达的问题 启动子选择不当：如果用于驱动荧
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