EBY100酵母展示

酿酒酵母感受态细胞的制备、转化

酿酒酵母感受态细胞的制备 （1）从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基，30℃，250 rpm 培养过夜。 （2）测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 （3）将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 （4）在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr，使其OD600值达到0.6~1.0。 （5）于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞，弃上清。 （6）用10 ml 洗液洗酵母

Science 重磅成果：西湖大学团队攻克共价蛋白药物核心瓶颈，建立通用高通量速效蛋白筛选平台

构象，大幅降低反应能垒，共价交联速率最高提升 100 倍，完美填平 “代谢快、反应慢” 的时间差。 图2 快速反应共价蛋白的设计原理   共价小分子药物能和靶点牢牢结合不脱落，作用持久、抗癌效果突出。科研人员希望把这套共价设计思路用在微型蛋白药物上 —— 这类小分子蛋白更容易渗透肿瘤组织。但该路线有两大关键难点： 微型蛋白进入人体后很快被代谢清除，可共价化学键的生成反应速度很慢，二者时间尺度完全不匹配；同时业内缺少能大规模筛选、优化共价反应效率的蛋白改造技术。 为破解该难题，团队创新提出 “分子预

酿酒酵母培养基配方与酵母细胞培养和诱导表达方法

ml。 室温保存1-2个月。 **也可以所有组分一起灭菌，但是可能会发生焦化作用，然而焦化作用不会引起任何问题。 生长选择合成培养基(Selective Growth Synthetic Media) 2x (SD – CAA) 1)用于EBY100菌株配套 pYD 系列载体 ，或者二配体酵母配套pPNL20 和pPNL30 载体 10 g/L 酪蛋白水解物casamino acids (-ade, -ura, -trp