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文献和实验DETECTION OF ß-GALACTOSIDASE AND ALKALINE PHOSPHATASE ACTIVITIES IN TISSUE
(can vary from 5-35 mM) 35 mM potassium ferricyanide (can vary from 5-35 mM) 2 mM MgCl2 0.02% Nonidet P-40 (NP-40) (diluted from 10% stock solution) 0.01% Na deoxycholate (diluted from 10% stock solution) in PBS X-gal
Affinity Purification of Proteins Binding to GST Fusion Proteins
Figure 20.2.2 Purification of an interacting test protein from a crude E. coli extract (−80)/(+80). Crude E. coli extracts from control cells (−80) or cell sexpressing the yeast negative regulator Gal80p (+80) were incubated with a GST fusion
；可增强大肠杆菌中的表达水平。硫氧还蛋白尽管其尺寸很小（11kDa），但硫氧还蛋白作为促溶标签非常有效（与所有增溶标签一样，溶解度不一定意味着功能性折叠，并且融合蛋白可能在其标签被切割时发生沉淀）。硫氧还蛋白有个独特的性质，就是耐高温，在高达 80°C 的温度下稳定，并且可以赋予其融合伴侣一定的热稳定性。这样，细胞蛋白可以经热变性处理而不影响融合蛋白。纯化可以使用苯基胂氧化物树脂或抗体共轭树脂来实现。V5来源于副粘病毒 SV5 的 P / V 蛋白的 95 - 108 位氨
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