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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避光
- 规格:
10ml
产品名称:Hoechst 33342 染色液-10ml
产品概述:
Hoechst 33342,也称bisBenzimide H33342,它是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm, 最大发射波长为461nm。封片后在荧光显微镜下观察细胞凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染或呈碎块状致密浓染。
1. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2. Hoechst 33342 染色液在染色过程中要避光.。
该产品被引用文献(仅展示部分):
1、Liu Y; Lei Y X; Li J W, et al., G Protein-Coupled Receptor 120 Mediates Host Defense against Clostridium perfringens Infection through Regulating NOD-like Receptor Family Pyrin Domain-Containing 3 Inflammasome Activation. J Agric Food Chem 2023, 71 (18), 7119-7130.
PubMed: 37115810
2、Jian W; Xue W; Wang T, et al., RBM4 inhibits the growth of clear cell renal cell carcinoma by enhancing the stability of p53 mRNA. Mol Carcinog 2023, 62 (4), 464-478.
PubMed: 36585906
3、Liu Y; Xing L-H; Li F-X, et al., MLKL protects against Clostridium perfringens infection by enhancing NLRP3 inflammasome-extracellular traps axis. iScience 2022, 105121.
PubMed: 36185365
4、Wang L-W; He J-f; Xu H-Y, et al., Effects and mechanisms of 6-hydroxykaempferol 3, 6-di-O-glucoside-7-O-glucuronide from Safflower on endothelial injury in vitro and on thrombosis in vivo. Frontiers in Pharmacology 2022, 3628.
PubMed: 36210813
5、Jia H; Wang X; Liu W, et al., Cimicifuga dahurica extract inhibits the proliferation, migration and invasion of breast cancer cells MDA-MB-231 and MCF-7 in vitro and in vivo. J Ethnopharmacol 2021, 277, 114057.
PubMed: 33771643
使用说明:
1. 对于固定的细胞或组织:
(1) 贴壁细胞
a. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5min或更长时间,用细胞培养基PBS或0.9%NaCl洗涤3遍,再用细胞培养液洗涤1遍。将盖玻片置于6孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。
b. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10min或4℃过夜。
c. 去固定液,用 PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min,吸尽液体。
d. 加入0.5ml Hoechst 33342 染色液,染色5min。也宜用摇床,或手动晃动数次。
e. 用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min,之后用抗淬灭封片液封片。
(2)悬浮细胞
a. 离心收集细胞样本于1.5ml离心管内,加入0.5ml固定液,缓缓悬起细胞,固定10min或4℃过夜。
b. 离心去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min。
c. 离心后吸去大部分液体保留约50μl液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
d. 稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动,均匀滴上0.5ml Hoechst 33342 染色液,染色5min。用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干。
e. 用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min,之后用抗淬灭封片液封片。
(3)组织切片
对于任何常见切片,处理至常规可以进行免疫染色时,或完成常规的免疫染色后,用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min,即可进行后续的Hoechst 33342 染色液,染色5-10min,用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍,每次3min,之后用抗淬灭封片液封片。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量Hoechst 33342 染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔 需加入100μl染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30min。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
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文献和实验PubMed: 37115810
2、Jian W; Xue W; Wang T, et al., RBM4 inhibits the growth of clear cell renal cell carcinoma by enhancing the stability of p53 mRNA. Mol Carcinog 2023, 62 (4), 464-478.
PubMed: 36585906
3、Liu Y; Xing L-H; Li F-X, et al., MLKL protects against Clostridium perfringens infection by enhancing NLRP3 inflammasome-extracellular traps axis. iScience 2022, 105121.
PubMed: 36185365
4、Wang L-W; He J-f; Xu H-Y, et al., Effects and mechanisms of 6-hydroxykaempferol 3, 6-di-O-glucoside-7-O-glucuronide from Safflower on endothelial injury in vitro and on thrombosis in vivo. Frontiers in Pharmacology 2022, 3628.
PubMed: 36210813
5、Jia H; Wang X; Liu W, et al., Cimicifuga dahurica extract inhibits the proliferation, migration and invasion of breast cancer cells MDA-MB-231 and MCF-7 in vitro and in vivo. J Ethnopharmacol 2021, 277, 114057.
PubMed: 33771643
Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
Hoechst33258(或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 (或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液:称取Hoechst33258(或Hoechst33342)1mg,用20ml蒸馏水溶解,过滤,4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液,pH7.0。 固定液:4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化,用PBS洗5min; 或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min; 或细胞
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