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- 万类生物
- 中国
- WLA036a
- 2026年04月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃，避光
- 保质期：
一年
- 规格：
10ml
产品名称：Hoechst 33258 染色液-10ml
产品概述:
Hoechst 33258，也称bisBenzimide H33258，它是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm， 最大发射波长为461nm。封片后在荧光显微镜下观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
该产品被引用文献（仅展示部分）：
1、Bian Y; Zeng H; Tao H, et al., A pectin-like polysaccharide from Polygala tenuifolia inhibits pancreatic cancer cell growth in vitro and in vivo by inducing apoptosis and suppressing autophagy. Int J Biol Macromol 2020, 162, 107-115.
PubMed: 32531363
2、Wang Y; Zhao B; Fei Y, et al., Ma xing shi gan decoction eliminates PM2.5-induced lung injury by reducing pulmonary cell apoptosis through Akt/mTOR/p70S6K pathway in rats. Biosci Rep 2020, 40 (7).
PubMed: 32627816
3、Zhang C; Liu P, Hepatitis B virus X protein upregulates alpha-fetoprotein to promote hepatocellular carcinoma by targeting miR-1236 and miR-329. J Cell Biochem 2020, 121 (3), 2489-2499.
PubMed: 32058096
1. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2. Hoechst 33258染色液在染色过程中要避光.。
使用说明:
1. 对于固定的细胞或组织：
（1） 贴壁细胞
a. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5min或更长时间，用细胞培养基PBS或0.9%NaCl洗涤3遍，再用细胞培养液洗涤1遍。将盖玻片置于6孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
b. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10min或4℃过夜。
c. 去固定液，用 PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min，吸尽液体。
d. 加入0.5mlHoechst 33258染色液，染色5min。也宜用摇床，或手动晃动数次。
e. 用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min，之后用抗淬灭封片液封片。
（2）悬浮细胞
a. 离心收集细胞样本于1.5ml离心管内，加入0.5ml固定液，缓缓悬起细胞，固定10min或4℃过夜。
b. 离心去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min。
c. 离心后吸去大部分液体保留约50μl液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上，尽量使细胞分布均匀。
d. 稍晾干，使细胞贴在载玻片上不易随液体流动，均匀滴上0.5mlHoechst 33258染色液，染色5min。用吸水纸从边缘吸去液体，微 晾干。
e. 用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min，之后用抗淬灭封片液封片。
（3）组织切片
对于任何常见切片，处理至常规可以进行免疫染色时，或完成常规的免疫染色后，用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min，即可进行后续的Hoechst 33258染色，染色5-10min，用PBS或0.9%NaCl洗涤2遍，每次3min，之后用抗淬灭封片液封片。
2. 对于活细胞或组织：
a. 加入适当量Hoechst 33258染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔 需加入100μl染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30min。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
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文献和实验PubMed: 32531363
2、Wang Y; Zhao B; Fei Y, et al., Ma xing shi gan decoction eliminates PM2.5-induced lung injury by reducing pulmonary cell apoptosis through Akt/mTOR/p70S6K pathway in rats. Biosci Rep 2020, 40 (7).
PubMed: 32627816
3、Zhang C; Liu P, Hepatitis B virus X protein upregulates alpha-fetoprotein to promote hepatocellular carcinoma by targeting miR-1236 and miR-329. J Cell Biochem 2020, 121 (3), 2489-2499.
PubMed: 32058096
Hoechst 33258染色1．原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮
Testing for Mycoplasma by Indirect DNA Stain (Hoechst 33258 stain)
Materials Media� pre-warmed to 37ºC (refer to the ECACC Cell Line Data Sheet for the correct medium) 70% ethanol in water (Prod. No. R8382 ) Methanol (Prod. No. 175 ) Acetic Acid Glacial (Prod. No. A6283 ) Hoechst 33258
Hoechst33258（或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 （或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液：称取Hoechst33258（或Hoechst33342）1mg，用20ml蒸馏水溶解，过滤，4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液，pH7.0。 固定液：4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化，用PBS洗5min； 或冰冻切片用冰丙酮固定15min，吹干，用PBS洗5min； 或细胞
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