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- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml
产品名称:10×PBS缓冲液干粉(免疫组化专用)
产品概述:本产品可用于免疫组化整个实验流程,包括PBS清洗;抗原修复液的配制以及一抗、二抗和三抗的稀释等。
注意事项:
1. 开封后请尽快使用。
2. 不可以重复使用。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作流程:
1. 取一瓶 10×PBS缓冲液干粉,倒入洁净的烧杯中,加入蒸馏水定容至100ml,即为10×PBS缓冲液。
2. 将10×PBS缓冲液用蒸馏水稀释至1×PBS 缓冲液,调节PH值至7.0~7.4左右,混匀后即可使用。剩余PBS缓冲液4℃保存,建议尽快使用完。
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文献和实验我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!
核蛋白提取: (1)5 millions个离心收集 (2)弃上清,细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液,4℃下2000 rpm离心5min。 (3)弃上清,沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集,再悬于0.5 ml Buffer A。 (4)冰上放置10分钟,加入NP40使终浓度为0.5%,混匀后,轻摇20秒。 (5)4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。 (6)重悬于50µl Buffer B,于冰上强烈振荡15分钟,4℃下16300×g离心10分钟
PBS的配制:在800ml蒸馏水中溶解8g NaCL,0.2g KCL,1.44g 磷酸氢二钠和0.24克磷酸二氢钾,用HCL调节溶液的pH值至7.4,加水定容至1升,在1.034x10(5),高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制,而不用摩尔分数表示。PBS(Phosphate-buffered Saline) 分子克隆上的配方NaCl: 8gKCl: 0.2gNa2HPO4: 1.44gKH2PO4: 0.24g溶到800ml蒸馏水中 盐酸调pH
Buffer CI 稀释至 1×; 1.2 用 1 ml Buffer CI 溶解冻干粉的 Fab-Strep,用移液器反复吹打,不能涡旋!溶解后的 Fab-Strep 进行分装保存(可 200µl 每管),冻存于- 20°C,避免反复冻融; 1.3 往 200µl 溶解后的 Fab-Strep 中,加入 800µl 的 Buffer CI 。此时,Fab-Strep 溶液已准备好,可直接使用了; 1.4 加入 200µl 100 mM 的生物素至 20 ml Buffer CI 中,混匀
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