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血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒-50T

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  • ￥400
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  • 中国
  • WLA115a
  • 2025年12月19日
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    • 规格：

      50T

    万类生物试剂促销：试剂盒8折优惠，血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒-50T 原价400元，现价320元。

    产品名称：血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒

    产品概述：本试剂盒是用于提取动物组织、血液、革兰氏阴性细菌及培养细胞等基因组DNA的提取试剂盒。试剂盒由细胞裂解液裂解细胞释放基因组DNA，再结合DNA制备膜技术纯化基因组DNA。本试剂盒具有高效、快速、方便等特点。使用本试剂盒可从2～25 mg的动物组织、50～100 μl的哺乳动物全血（含抗凝剂）、1～10 μl的有核红细胞全血（含抗凝剂）、1.0～5.0×10 9 的革兰氏阴性细菌、1.0×105～1.0×10 7 的培养细胞中纯化得到高纯度基因组DNA。

    注意事项：
    1. 应尽量使用新鲜的实验材料，以确保提取到高纯度的基因组DNA。
    2. 基因组DNA需长期保存时，建议用洗脱缓冲液EB洗脱。
    3. 组织材料切勿超过最大起始量，且要充分裂解，否则可能影响收量，甚至会堵塞吸附柱。如果发生吸附柱堵塞现象可提高离心力至15,000 rpm，并适当延长离心时间。
    4. 如果组织裂解后过于粘稠，可再添加一次相同体积的溶液GL、Proteinase K和RNaseA，继续裂解。

    操作流程：
    实验前的准备
    1. 准备56°C水浴。
    2. 溶液GL若出现沉淀，请于65°C加热溶解，待恢复至室温后使用。
    3. 漂洗液WB在首次使用前，请添加56 ml的100%乙醇，混合均匀。
    4. 洗脱结合于DNA制备膜上的基因组DNA时，将洗脱液或灭菌蒸馏水加热至65°C使用会提高基因组 DNA 的洗脱效率。
    操作方法
    1. 组织或细胞的裂解：
    使用不同的实验材料需采用不同的裂解步骤，具体说明如下：
    ◆动物组织的裂解：（具体操作步骤请参照本公司组织基因组DNA提取试剂盒 货号为WLA058）
    ◆全血的裂解：（具体操作步骤请参照本公司全血基因组DNA提取试剂盒 货号为WLA057）
    ◆E.coli等革兰氏阴性菌的裂解：（具体操作步骤请参照本公司细菌基因组DNA小量纯化试剂盒 货号为WLA054）
    ◆悬浮培养的动物细胞的裂解：
    ① 用1.5 ml Tube收集1.0×105～1.0×107 的细胞悬浮液，5,000 rpm离心5分钟，弃上清（细胞培养液）。
    ② 加入200 μl的灭菌水或PBS溶液悬浮细胞。
    ③ 加入180 μl的溶液GB、20 μl的Proteinase K和10μl的RNase A（10 mg/ml），吸打混匀，于56℃水浴温浴10分钟。
    ④ 向裂解液中加入200 μl 100%乙醇，充分吸打混匀。
    ◆贴壁细胞的裂解：
    ① 弃尽培养液，向每10 cm2的贴壁细胞中加入1 ml PBS，用移液枪的枪头吹落贴壁培养细胞，转移至1.5 ml Tube中，5,000 rpm离心5分钟，弃上清，加入200 μl的灭菌水或PBS溶液悬浮细胞。
    ② 加入180 μl 溶液GB、20 μl的Proteinase K和10μl的RNase A（10 mg/ml），收集细胞悬液，充分吸打混匀，于56℃水浴温浴10分钟。
    ③ 向裂解液中加入200 μl 100%乙醇，充分吸打混匀。
    2. 将吸附柱安置于收集管上，溶液移至吸附柱中，12,000 rpm离心2分钟，弃滤液。
    3. 将500 μl的溶液 WA 加入至吸附柱中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。
    4. 将700 μl的溶液 WB 加入至吸附柱中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。
    注）请确认溶液 WB 中已经加入了指定体积的100%乙醇。
    请沿吸附柱管壁四周加入溶液WB，这样有助于完全冲洗沾附于管壁上的盐份。
    5. 重复操作步骤4。
    6. 将吸附柱安置于收集管上，12,000 rpm离心2分钟。
    7. 将吸附柱安置于新的1.5 ml的离心管上，在吸附柱膜的中央处加入50～200 μl的灭菌水或洗脱液EB，室温静置5分钟。
    注）将灭菌水或洗脱液EB加热至65℃使用时有利于提高洗脱效率。
    8. 12, 000 rpm离心2分钟洗脱DNA。
    如需获得更大收量，可将离下液重新加入到吸附柱膜的中央或再加入50～200 μl的灭菌水或洗脱液EB，室温静置5分钟后，12,000 rpm离心2分钟洗脱DNA。
    9. 基因组DNA定量。
    提取得到的基因组DNA可通过电泳或吸光度测定以定量。

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