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- 详细信息
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- 保存条件:
4℃保存一年;-20℃长期保存
- 库存:
10
- 供应商:
乔羽生物
- 规格:
瓶
编号:QY-mv0138
细胞名称:LLC-PK1 猪肾细胞
规格:瓶
用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗.
LLC-PK1 猪肾细胞报价细胞株培养无菌技术要点:
1. 实验开始前,无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌,用70%ethanol擦拭无菌操作台面,并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后,才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株,即使培养基完全相同也不可共用培养基,以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后,请将实验物品拿出工作台,用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后,才能进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞,必要物品(试管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暂时放置,其它实验用品使用完毕后应移出,有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成,请勿在边缘非无菌区域进行操作。
3. 小心取用无菌实验物品,避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处,也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后,请用手夹住瓶盖并轻握瓶身,倾斜大约45°角取用,尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
4. 工作人员应当首先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台进行(至少是Class II)。操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心有毒性药品,例如DMSO和TPA等,并避免针头的伤害等等。
5. 定期检测下列项目:
5.1. CO2钢瓶的CO2压力
5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染(水盘的水需用无菌水,每周定时更换)。
5.3. 无菌操作台内的airflow压力,定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。
6. 水槽内可添加消毒剂(Zephrin 1:750),需定期更换水槽中的水。
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文献和实验我和师兄是从04年初就开始用LLC-PK1细胞系筛选多种类型的、数量极多的各种可能有用的新药,摸索发现消化液的配方为0.25%的胰酶+0.02%EDTA 就行了,要配在PBS中,如果能加Hepes那就更保险了(有一次实验室Hepes用光了,配液时没加Hepes,照样没问题) 消化步骤:吸走培液后最好用PBS过一遍->50ML培养瓶加2ML在37ºC预热消化液->37ºC温箱放置1Min->显微镜下观察,细胞松散开,但尚未脱落时,及时吸走消化液->必要时可在吸走消化液的情况下,继续放置一会
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