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1
- 供应商:
凯基生物
- 细胞类型:
巨噬细胞
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
冻存管或培养瓶
1×10E6细胞/管
培养条件:DMEM(高糖),胎牛血清
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
和培养器皿的材料也有关,有时RAW264.7细胞会出现太容易吹下的情况,连分化细胞都贴壁较松,此时更适宜用巴氏管吹打; 4. 培养时,无法保证100% 不分化,通过传代可以将分化比例控制在一定范围 5. RAW264.7细胞分裂活跃,记得每天看一看,周末也要抽点时间关心一下它哦~ 小知识 RAW 264.7细胞系的起源 加利福尼亚索尔克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)诱发肿瘤的腹水中建立了RAW 264细胞
MOI 值 50-200,puromycin 常规剂量 1-2 µg/mL;一般不需要加助转剂 polybrene。 ②Jurkat 细胞 Jurkat 细胞是一种常用的人类T细胞白血病细胞系,是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 Jurkat 细胞感染慢病毒的 MOI 以 50-80 为宜,一般不需要加助转剂 polybrene。 图 6:慢病毒感染 Jurkat 细胞 ③RAW264.7 细胞 RAW264.7 中文全名为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,属贴壁细胞,最好的形态呈现










