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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详询
- 细胞类型:
小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
RAW264.7
- 生长状态:
贴壁细胞
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
雄;成年
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
不规则形
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
小鼠
- 相关疾病:
白血病
- 组织来源:
Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
别称:RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7
种属:小鼠
年龄(性别):雄;成年
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:不规则形
生长培养基:DMEM高糖(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例:1:3-1:4
推荐换液频率:2-3天/次
冻存条件:冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度:液氮
培养条件 :
气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
背景描述:RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW 264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。RAW 264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用。
细胞计数
原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。
操作步骤:
1.将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上;
2.轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中;
3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数,压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞(如右侧和下方);若镜下有2个细胞组成的细胞团,则应按单个细胞计算;若细胞团数量较多,占细胞总量的10%左右,则说明细胞分散不好会导致计算不准确,需要重新制备细胞悬液;
4.按公式计数细胞数量:细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4
(每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需×104)
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核/巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后,进入血流分布于各种器官组织,并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子.其中受体多达数十种,如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6),补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR),以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13),介导单核/
・ Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab) Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from anticoagulated venous blood are isolated by layering onto histopaque
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