- ￥888
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 20126ES50
- 2026年04月19日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃保存
- 保质期：
有效期1年
- 英文名：
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
50T
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
| Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒 | 20126ES50 | 50 T | -20℃ | 935.00 |
| Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒 | 20126ES60 | 100 T | -20℃ | 1545.00 |
产品描述
细胞核蛋白、细胞浆蛋白在细胞研究和蛋白质组学中具有重要意义，因此在体外研究中需要将其从细胞或组织中分离。本试剂盒提供了一种较为简单方便，高效的蛋白抽提方法，其原理是：通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂C抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒1次可对2×106个细胞和30-50 mg组织样品进行抽提，按照该使用量，20126ES50可抽提50个样品，20126ES60可抽提100个样品。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 20126ES50（50T） | 20126ES60（100T） | ||
| 20126-A | Cytoplasmic Extraction Reagent A 胞浆蛋白抽提试剂A | 15 mL | 30 mL |
| 20126-B | Cytoplasmic Extraction Reagent B胞浆蛋白抽提试剂B | 0.5 mL | 1 mL |
| 20126-C | Nuclear Extraction Reagent 胞核蛋白抽提试剂 | 2.5 mL | 5 mL |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，1年有效。
注意事项
1）客户需自备PMSF。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
将试剂盒各组分溶解后立即放置在冰上，混匀。取适量的胞浆蛋白抽提试剂A（以下统称：试剂A）和胞核蛋白抽提试剂（以下统称：试剂C）备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM。
1 细胞样品蛋白的抽提
1）细胞处理
对于贴壁细胞：PBS清洗细胞1次，EDTA溶液消化细胞或用细胞刮子刮下细胞，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽量吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
【注】：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解抽提的目的蛋白。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，PBS清洗细胞1次，收集细胞，尽量吸尽上清，留细胞沉淀备用。
2） 每20 µL细胞沉淀加入200 µL含PMSF的试剂A。
【注】：对于2×106个Hela细胞，其细胞沉淀的体积大约为20 µL或40 mg。
3） 最高速剧烈涡旋5 s，完全悬浮分散细胞沉淀。
【注】：如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开，可以适当延长旋涡震荡的时间。
4） 冰浴10-15 min。
5） 加入胞浆蛋白抽提试剂B（以下统称：试剂B）10 µL。最高速剧烈涡旋5 s，冰浴1 min。
6） 最高速剧涡旋5 s，4℃ 12,000-16,000 g离心5 min。
7） 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，上清即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用，也可以冻存备用。
【注】：此步千万不要触及沉淀，可以在沉淀上方保留极小体积的上清，以免吸到沉淀。
8） 对于沉淀，完全吸尽残余上清，加入50 µL含PMSF的试剂C。
【注】：此步需完全吸尽上清，否则会带来细胞浆蛋白的污染。
9） 最高速剧烈涡旋15-30 s，把沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中，每隔1-2 min再高速剧烈涡旋15-30 s，共30 min。10）4℃ 12,000-16,000 g离心10 min。
11）立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用，也可以-70℃冻存备用。
2 组织样品的抽提
1）将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B，并加入PMSF至最终浓度为1 mM，混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60 mg组织加入200 µL组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液，并在玻璃匀浆器内充分匀浆。
【注】：匀浆需在冰浴或4℃进行。
2）匀浆后将匀浆液转移至塑料离心管内，冰浴放置15 min。
3）4℃ 1,500 g离心5 min。把上清转移至一预冷的塑料管中，上清含部分细胞浆蛋白。
【注】：吸上清时千万不要触及沉淀。
4）对于上述收集得到的沉淀，已经充分匀浆，但很多细胞仍没有破碎。接下来请参照【细胞样品蛋白抽提】的步骤2）开始操作，即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作，即可得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤【组织样品抽提】中步骤3）抽提得到的细胞浆蛋白合并备用。
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文献和实验[2] Wei Y, Sun H, Zhang S, et al. Multi-walled carbon nanotubes inhibit potential detoxification of dioxin-mediated toxicity by blocking the nuclear translocation of aryl hydrocarbon receptor. J Hazard Mater. 2022;430:128458. doi:10.1016/j.jhazmat.2022.128458(IF:10.588)
[3] Zhao XB, Chen YP, Tan M, et al. Extracellular Matrix Stiffness Regulates DNA Methylation by PKCα-Dependent Nuclear Transport of DNMT3L. Adv Healthc Mater. 2021;10(16):e2100821. doi:10.1002/adhm.202100821(IF:9.933)
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不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP009 50 Assays 300 生工 细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白，提取制备过程简便。制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验
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wyj2002 低氧诱导因子-1 是一种核转录因子，看到有些文献直接抽胞浆蛋白进行实验，请问有经验的朋友，是抽取胞浆蛋白还是核蛋白？先谢过了！ xhjggl 可以用胞浆蛋白和核蛋白提取试剂盒，确定其在胞浆和核中的的分布情况，也可能是在胞浆中合成再进入细胞核中的，上海生工就有这样的试剂盒卖。 细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein
