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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20 °C分装保存
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
Sodium Orthovanada
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
10g
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
| Sodium orthovanada正钒酸钠 | 20133ES10 | 10g | 室温 | 193 |
正钒酸钠英文名称为Sodium orthovanada, 是一种常用的竞争性磷酸酶抑制剂,可以抑制碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP),酸性磷酸酶(acid phosphatase),酪氨酸磷酸酶(tyrosine phosphatase, TP)等,也可以抑制Na+/K+ATPase等ATPase。常用于抑制蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活,在提取细胞或组织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。在加入EDTA或经稀释后,正反酸钠的抑制表现可逆性。
正钒酸钠使用前需要先被充分活化(去聚合)以获得最大的磷酸酶抑制活性。本产品以粉末形式提供,对其活化(去聚合)后方可使用。翊圣另有以活化正钒酸钠供应【Cat#20122】,常见使用浓度范围为1-10 mM。
产品性质
| 中文别名(Chinese synonym) | 原钒酸钠 |
| 英文别名(English synonym) | Sodium vanadate |
| CAS号(CAS No.) | 13721-39-6 |
| 分子式(Formula) | Na3VO4 |
| 分子量(Molecular Weight) | 183.91 |
| 纯度(Purity) | >96% |
| 外观(Appearance) | 白色至类白色粉末 |
| 溶解性(Solubility) | 易溶于水,不溶于乙醇 |
| 外观(Appearance) | 灰白色至白色结晶 |
| 结构式(Structure) | ![]() |
室温运输和保存。可配成100-200 mM储存液于-20 °C分装保存,1年稳定。
溶解与使用
使用前,正钒酸钠需要先被充分活化(去聚合)以获得最大的磷酸酶抑制活性,步骤如下:
1)正钒酸钠溶于水配制200 mM的溶液,称取适量正钒酸钠粉末溶于纯水中。
2)用1N NaOH或1N HCl调整pH至10.0。正钒酸钠起始溶液的pH值依批次变化而有差异。pH 10.0溶液呈现黄色。
3)加热煮沸,直至溶液变为无色(大概煮10 min),所有的结晶必须充分溶解。
4)冷却至室温。
5)重新调整pH至10.0,并重复步骤3)4)直至溶液保持无色且pH稳定在10.0。
6) 将活化的正钒酸钠溶液分装成小份(如1 ml),-20 °C保存。储存液可直接加入细胞或组织裂解液,稀释到工作液如1 mM。细胞培养实验需要先用0.2 um滤膜过滤除菌后,稀释加入培养基内;
7)从-20 °C取出分装小样融化后,需加热溶液约至90~100 °C,漩涡混匀,充分溶解结晶。
注意事项
1)正钒酸钠对人体有害,请注意小心防护。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
| 20110ES03 | Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×) 磷酸酶抑制剂混合物(100×) | 1ml | 198.00 |
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| 60369ES60 | β-Glycerophosphate disodium salt hydrate 甘油磷酸钠水合物 | 100g | 185.00 |
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| 20122ES10 | Sodium Orthovanadate (Vanadate) Solution, Pre-activated 预活化正钒酸钠溶液 | 10ml (200mM) | 128.00 |
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文献和实验: 1.一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。 2.加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可。 3.磷酸化抗体的好坏是一个关键因素,所以要选择好的厂商。个人认为,Cell signaling公司做的磷酸化抗体不错,尤其是MAPKs磷酸化抗体。
1.一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。 2.加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可。 3.磷酸化抗体的好坏是一个关键因素,所以要选择好的厂商。个人认为,Cell signaling公司做的磷酸化抗体不错,尤其是MAPKs磷酸化抗体。 3.最好根据厂商的protocol
我做了很久的western blot,尤其是phospho-抗体,可以算是达人了。我根据自己的经验,对磷酸化蛋白之western blot提出以下建议,供刚入门的同仁参考:1. 一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。 2. 加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可












