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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
- 通用型强力抗原修复液(10X)产品简介:
1. 通用型强力抗原修复液(All-purpose Powerful Antigen Retrieval Solution)是一种可以直接逆转醛类固定试剂交联作用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
2. 本通用型强力抗原修复液的抗原修复效果总体上要优于常用的柠檬酸钠抗原修复液。
3. 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
4. 本抗原修复液采用了可以直接逆转醛类固定试剂交联作用的试剂,可以非常有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
5. 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
6. 本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
7. 一个包装的本产品可以配制成1000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于100个样品。 - 通用型强力抗原修复液(10X)使用方法:
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b. 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约5分钟X2次(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)
使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用
PBS洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片: 用PBS洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约5分钟X2次(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 - 通用型强力抗原修复液(10X)yb-11515R ENTPD2CD39样蛋白1抗体 浓度1mg/ml
yb-10035R EIF5真核翻译起始因子5抗体 浓度1mg/ml
yb-11740R EBF2早期B淋巴细胞因子2抗体 浓度1mg/ml
yb-11741R ELAVL2ELAVL2蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11743R ELAVL2 + ELAVL4ELAVL2+ELAVL4蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11744R Engrailed 1同源盒蛋白转录因子EN1抗体 浓度1mg/ml
yb-11745R ER81转录因子ER81蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-12560R EAA1谷氨酸受体KA1抗体 浓度1mg/ml
yb-12057R eIF3K真核翻译起始因子3K抗体 浓度1mg/ml
yb-6448R EGR3早期生长反应蛋白3抗体 浓度1mg/ml
yb-13069R EMSYEMSY蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-8470R FBXO36FBXO36 F-box蛋白相关蛋白36抗体 浓度1mg/ml
yb-11345R ERC2CAST1蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11344R ERC1RAB6蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11346R EGFLAM皮卡丘素抗体 浓度1mg/ml
yb-11319R ELAVL4ELAVL4蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-11182R EMR1表皮生长因子样激素受体1 浓度1mg/ml
yb-3292R phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202)磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 浓度1mg/ml
yb-0494R ETFA电子转移黄素蛋白α抗体 浓度1mg/ml
yb-8538R EP4前列腺素E受体蛋白4抗体 浓度1mg/ml
yb-0319R E1 glycoprotein风疹病毒糖蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-9662R EFR3AEFR3A蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-9660R ENAHENAH蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-7610R ETHE1乙基丙二酸脑病蛋白抗体 浓度1mg/ml
yb-1722R E2F3转录因子E2F-3抗体 浓度1mg/ml
yb-1734R E2F5转录因子E2F-5抗体 浓度1mg/ml
yb-1726R ERCC1DNA切除修复蛋白1抗体 浓度1mg/ml
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文献和实验10X TBE BUFFER 3 Liters 324 g Tris base 165g Boric acid 120mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave for 20 min 2 Liters 216g Tris base 110g Boric acid 80mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave
我们在学习westgard质控规则时,对于“10X”规则会看到类似于这样的描述:“1个水平的质控连续10次结果落在平均值(靶值线)的一侧或2个水平的质控同时各有连续5次的结果落在平均值(靶值线)的一侧,就判断为失控,该规则提示存在系统误差”。通过以上对10X描述的理解,我们就会很自然地将图1中的质控数据判定为失控: 图1 那我们再看一组在控的质控数据,如图2:
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法,也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位,在进行抗原修复之前,可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而,这一步骤也需要进一步优化,包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时,通常将其分为两大类:蛋白酶诱导表位修复(PIER)和热诱导表位修复(HIER)。一旦优化,抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复(PIER) 在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
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