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上海乔羽生物科技有限公司
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96孔
Corning,进口培养板,无菌包装数量:库存
货号:QY-EFYH253-315
规格:96孔
品牌:美国/corning
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文献和实验~15 分钟。(4)吸去培养板中的培养基,用 PBS 或者无血清培养基清洗一次。(5)加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。(6)到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养 24~48 小时。3. 第二次细胞传代(1)在转染后 24 小时,观察实验结果并记录绿色荧光蛋白表达情况。(2)再次进行细胞传代,按照免疫染色合适的密度 0.8X105 个细胞/35 mm 培养皿将细胞重新装入培养皿中。(3)在正常条件下培养 24 小时后按照染色要求条件固定。转染
最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。PBS配方:Nacl 8gKcl 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调ph 7.4定容1L关于细胞的接种(铺板)细胞过了30代以后就不要用了,因为状态不好了;培养板要用好的(最好进口板),不好的板或重复利用的板只可做预实验。接种时最好按照预实验摸索出的密度
于分离液的层面,在吸取PBMC时非常容易混入这些杂质,由于混入细胞的细胞碎片和血红素很难清洗去除,在进行ELISPOT实验时,有可能沉积在培养板底,严重影响细胞因子和抗体的结合,进而影响实验结果。 3. 采用什么方法分离外周血淋巴细胞适合于ELISPOT试验? 答:使用淋巴细胞分离液,推荐使用进口淋巴细胞分离液,如:Lymphoprep,或者NycoPrep 1.077(无寡糖)。避免使用红细胞裂解液分离淋巴
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