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2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (

No Dye)
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  • 上海钰博
  • 进口/国产
  • YB10106ES03
  • 2025年07月15日
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      6个月

    • 英文名：

      2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (No Dye)

    • 库存：

      1000

    • 供应商：

      钰博生物

    2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (No Dye)产品描述

    2×HieffTM PCR Plus Master Mix (No Dye)包含Taq Plus DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。Mix中不含有溴酚蓝染料，其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。
    产品信息

    组 分

    产品编号/规格

    10106ES03(1ml)

    10106ES08(5×1ml)

    2×HieffTM PCR Plus Master Mix

    1ml

    5×1ml

    超纯水（PCR Grade）

    1ml

    5×1ml

    运输与保存方法
    冰袋（wet ice）运输。收到产品后放到-20 ºC保存。
    2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (No Dye)质量控制
    核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
    核酸外内酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
    功能检测：50 μl体系中，以20 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的1 Kb条带。

    应用实例

    1. 反应体系配制（50μl）：
    模板DNA§

    optional

    引物1（10 μM）

    2 μl

    引物2（10 μM）

    2 μl

    2×HieffTM PCR Plus Master Mix

    25μl

    ddH2O

    up to 50μl

    § 针对不同模板的最佳反应浓度有所不同，下表为50μl反应体系推荐模板使用量，仅供参考。

    人基因组DNA

    0.1～1 μg

    大肠杆菌基因组DNA

    10～100 ng

    λDNA

    0.5～5 ng

    质粒DNA

    0.1～10 ng

    2. PCR循环反应条件
    94℃

    5 min（预变性）

    94℃

    30 sec

    35个循环

    55℃*

    30 sec

    72℃

    30 sec/kb

    72℃

    7 min（彻底延伸）

    * 退火温度需要根据引物的Tm值调整，一般设置成低于引物Tm值1-2℃即可。
    2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (No Dye)注意事项
    1. 操作注意事项
    由于Taq Plus DNA Polymerase室温下也有一定的反应活性，PCR反应体系配制需在冰上进行。体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。这样可以减少反应准备阶段的非特异扩增，有助于得到更好的PCR结果。
    2. 引物设计注意事项
    2.1 引物3’端最后一个碱基选择C或G；
    2.2 引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
    2.3 引物3’端尽量避免发卡结构的出现；
    2.4 引物Tm值控制在55℃-65℃之间；
    2.5 引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
    2.6 引物GC含量控制在40%-60%之间；
    2.7 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
    2×Hieff™ PCR Plus Master Mix (No Dye)yb1175 HPcF 人心包成纤维细胞 Human Pericardial Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1176 ATCC
    yb1177 视觉细胞系统 ATCC
    yb1178 HCEpiC 人角膜上皮细胞 Human Corneal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1179 HK 人角膜细胞 Human Keratocytes 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1180 HREC 人视网膜内皮细胞 Human Retinal Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1181 HRPEpiC 人视网膜色素上皮细胞 Human Retinal Pigment Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1182 HLEpiC 人晶状体上皮细胞 Human Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1183 HIPEpiC 人虹膜色素上皮细胞 Human Iris Pigment Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1184 HConF 人结膜成纤维细胞 Human Conjunctival Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1185 HNPCEpiC 人无色素睫装上皮细胞 Human Non-Pigment Ciliary Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1186 HTMC 人小梁网细胞 Human Trabecular Meshwork Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1187 HOCF 人眼脉络膜成纤维细胞 Human Ocular Choroid Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1188 HConEpiC 人结膜上皮细胞 Human Conjunctival Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1189 ATCC
    yb1190 胎盘细胞系统 ATCC
    yb1191 HVCEC 人绒毛膜毛细血管内皮细胞 Human Villus Capillary Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1192 HAmEpiC 人羊膜上皮细胞 Human Amniotic Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1193 HVT 人绒毛膜滋养层细胞 Human Villous Trophoblasts 1 x 10^6 cells/vial ATCC
    yb1194 HVMF 人绒毛间充质成纤维细胞 Human Villous Mesenchymal Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1195 脂肪细胞系统 ATCC
    yb1196 HAMEC 人脂肪微血管内皮细胞 Human Adipose Microvascular Endothelial Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
    yb1197 HPA-v 人前脂肪细胞--内脏 Human Preadipocytes-visceral 1 x 10^6 cells/vial ATCC
    yb1198 HPA-s 人前脂肪细胞--皮下 Human Preadipocytes-subcutaneous 1 x 10^6 cells/vial ATCC

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      -crack to help liberate the DNA. Check that the solution actually freezes. Overlay with a drop of mineral oil and incubate at 60°C for 60 minutes, followed by 95°C for 15 minutes. Cool to 4°C. Pipette 22.5 l of PCR master mix

    • PCR基础知识[PCR basics]

      of source DNA material • It does not necessarily require the use of radioisotopes or toxic chemicals • It involves preparing the sample DNA and a master mix with primers[Primer: A short DNA or RNA fragment annealed to a singled-stranded DNA

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