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2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye

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  • 上海钰博
  • 进口/国产
  • YB10103ES03
  • 2025年07月16日
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      密封干燥保存

    • 保质期：

      6个月

    • 英文名：

      2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye)

    • 库存：

      1000

    • 供应商：

      钰博生物

    2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye)产品描述

    2×HieffTM PCR Master Mix(No dye)是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase，dNTP混合物，MgCl2以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。

    体系中不含有溴酚蓝染料，其中的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置，或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

    2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye)产品信息

    编号

    组 分

    产品编号/规格

    10103ES03(1ml)

    10103ES08(5×1ml)

    10103-A

    2×HieffTM PCR Master Mix

    1ml

    1 ml×5

    10103-B

    超纯水（PCR Grade）

    1ml

    1 ml×5

    2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye)运输与保存方法

    冰袋（wet ice）运输。收到产品后放到-20 ºC保存。

    活性定义
    用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物，在74ºC，30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
    质量控制
    核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
    核酸内切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
    大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
    功能检测：50 μl体系中，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。
    稳定性检测：


    图1. 2 ×HieffTM PCR Master Mix分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后，菌落PCR扩增1.2 kb片段。电泳结果显示2 ×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。
    应用实例

    1. 反应体系配制（50μl）：
    模板DNA§

    optional

    引物1（10 μM）

    2 μl

    引物2（10 μM）

    2 μl

    2×HieffTM Taq Master Mix

    25 μl

    ddH2O

    up to 50 μl

    § 针对不同模板的最佳反应浓度有所不同，下表为50μl反应体系推荐模板使用量，仅供参考。

    人基因组DNA

    0.1～1 μg

    大肠杆菌基因组DNA

    10～100 ng

    λDNA

    0.5～5 ng

    质粒DNA

    0.1～10 ng

    2. PCR循环反应条件

    94℃

    5 min（预变性）

    35个循环

    94℃

    30 sec

    55℃*

    30 sec

    72℃

    60 sec/kb

    72℃

    7 min（彻底延伸）

    * 退火温度需要根据引物的Tm值调整，一般设置成低于引物Tm值1-2℃即可。
    2×Hieff™ PCR Master Mix(No dye)yb1200 女性生殖细胞系统 ATCC
    yb1201 HOMEC 人卵巢微血管内皮细胞 Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1202 HOSEpiC 人卵巢表层上皮细胞 Human Ovarian Surface Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1203 HOF 人卵巢成纤维细胞 Human Ovarian Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1204 HMMEC 人乳腺微血管内皮细胞 Human Mammary Microvascular Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1205 HMEpiC 人乳腺上皮细胞 Human Mammary Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1206 HMF 人乳腺成纤维细胞 Human Mammary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1207 ATCC
    yb1208 间充质干细胞系统 ATCC
    yb1209 HAMSC 人羊膜间充质基质细胞 Human Amniotic Mesenchymal Stromal Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1210 HCMSC 人绒毛膜间充质基质细胞 Human Chorionic Mesenchymal Stromal Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1211 HMSC-bm 人间充质干细胞--骨髓 Human Mesenchymal Stem Cells-bone marrow 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1212 HMSC-ad 人间充质干细胞--脂肪 Human Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1213 HMSC-hp 人间充质干细胞--肝脏 Human Mesenchymal Stem Cells-hepatic 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1214 HUMSC 人脐带间充质干细胞 Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1215 HPMSC 人肺间充质干细胞 Human Pulmonary Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1216 HVMSC 人脊椎间充质干细胞 Human Vertebral Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1217 ATCC
    yb1218 ATCC
    yb1219 脐带细胞系统 ATCC
    yb1220 HUVEC 人脐静脉内皮细胞 Human Umbilical Vein Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1221 HUAEC 人脐动脉内皮细胞 Human Umbilical Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1222 HUVSMC 人脐静脉平滑肌细胞 Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1223 HUASMC 人脐动脉平滑肌细胞 Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
    yb1224 ATCC
    yb1225 小鼠细胞系统 ATCC

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      -crack to help liberate the DNA. Check that the solution actually freezes. Overlay with a drop of mineral oil and incubate at 60°C for 60 minutes, followed by 95°C for 15 minutes. Cool to 4°C. Pipette 22.5 l of PCR master mix

    • PCR基础知识[PCR basics]

      of source DNA material • It does not necessarily require the use of radioisotopes or toxic chemicals • It involves preparing the sample DNA and a master mix with primers[Primer: A short DNA or RNA fragment annealed to a singled-stranded DNA

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      1 0.1-0.5µM Primer 2 0.1-0.5µM 10X Reaction buffer 1X Magnesium 1.0-3.0mM dNTP mix 200 mM each dNTP Thermostable DNA polymerase 1-4 units/100 ml reactionRT-PCR基础 RT-PCR将以RNA为模板的cDNA合成同PCR结合在一起，提供了一种分析基因表达的快速灵敏的方法。RT-PCR用于对表达信息进行

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