TOP10 Chemically Competent Cel

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）产品描述

本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

TOP1感受态细胞基因型：F-mcrA△(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15△lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Strr) endA1 nupG。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11801ES76（100 μl × 5管）

11801ES80（100 μl × 10管）

11801-A

TOP10感受态细胞

100 μl × 5

100 μl × 10

11801-B

pUC19（0.1 ng/μl）

10 μl

10 μl

使用方法

1) 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

注：一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl，可以根据实际情况分装使用，应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。

3) 将离心管置于42℃水浴中放置60-90s，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3min，该过程不要摇动离心管。

4) 向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min（150 rpm），目的是促使菌体复苏，抗性基因表达。

5)将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，37℃培养12-16 h。

注：涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存，一周之内可重新涂板。

运输与保存方法

干冰运输。

TOP10感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）注意事项

1) 感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

2)为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。

3) 为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）附录一：常用抗生素工作浓度

抗生素

翊圣货号

常用工作浓度

Ampicillin 氨苄青霉素

60203ES10

100 μg/ml

Carbenicillin羧苄青霉素

60202ES08

100 μg/ml

Chloramphenicol 氯霉素

60205ES10

33 μg/ml

Kanamycin 卡那霉素

60206ES10

30 μg/ml

Streptomycin 链霉亲和素

60211ES60

25 μg/ml

Tetracycline 四环素

60212ES25

15 μg/ml

TOP10 Chemically Competent Cell （TOP10化学感受态细胞）yb-hxbz-342 人前列腺癌细胞 gpc-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-343 人前列腺癌细胞 9L-B 规格25毫升/株.
yb-hxbz-344 人前列腺癌细胞 9L-E 规格25毫升/株.
yb-hxbz-345 人前列腺癌细胞 JCA-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-346 人前列腺癌细胞 VLcop 规格25毫升/株.
yb-hxbz-347 人前列腺上皮细胞 RWPE1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-348 人前列腺上皮细胞 RWPE2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-349 人男性正常龟头细胞系 HS68 规格25毫升/株.
yb-hxbz-350 小儿包皮细胞 HFF 规格25毫升/株.
yb-hxbz-351 人正常前列腺上皮细胞 RWPE-1 规格25毫升/株.
人血液循环系统
yb-hxbz-352 人慢性髓原白血病细胞 K562 规格25毫升/株.
yb-hxbz-353 人白血病阿霉素耐药株 K562/Adr 规格25毫升/株.
yb-hxbz-354 人原髓细胞白血病细胞 HL60 规格25毫升/株.
yb-hxbz-355 人白血病阿霉素耐药株 HL-60/Ad 规格25毫升/株.
yb-hxbz-356 人红白细胞白血病细胞Erythroleukemia HEL 规格25毫升/株.
yb-hxbz-357 人白血病细胞 SK 规格25毫升/株.
yb-hxbz-358 人急性早幼粒白血病细胞（悬浮） NB4 规格25毫升/株.
yb-hxbz-359 人白血病细胞 Daudi 规格25毫升/株.
yb-hxbz-360 人白血病细胞 KG-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-361 人T细胞白血病细胞 6T-CEM 规格25毫升/株.
yb-hxbz-362 人T细胞白血病细胞 HuT 78 规格25毫升/株.
yb-hxbz-363 人T细胞白血病细胞 A3 规格25毫升/株.
yb-hxbz-364 人单核细胞白血病细胞 THP-1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-365 人肥大细胞白血病细胞 CHMAS 规格25毫升/株.
yb-hxbz-366 人巨核细胞保白血病细胞 Dami 规格25毫升/株.
yb-hxbz-367 人巨细胞白血病细胞株 Mo7e 规格25毫升/株.
yb-hxbz-368 人成巨核细胞白血病细胞 MEG-01 规格25毫升/株.