Blasticidin S (10mg/ml in Sol

Blasticidin S (10mg/ml in Solution) 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）作用机理

Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷类抗生素，通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式，很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

Cat#60218ES10、60218ES50、60218ES60均已液体形式提供，浓度为10 mg/ml（in HEPES缓冲液，pH 7.5）。

Cat#:60218ES80为粉末形式提供，使用时可用无菌水或者缓冲液配制成5-10mg/ml的储存液。

Blasticidin S (10mg/ml in Solution) 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）抗性基因

目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种，一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls，另外两种是脱氨酶基因，包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD 基因是最常用的筛选标志，用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验，也可用于E.Coli。



产品性质

CAS

3513-03-9

分子式

C17H26N8O5·HCl

分子量

458.9

纯度

>95%（HPLC）

浓度

10 mg/ml in HEPES 缓冲液，pH 7.5

保存方法

在-20˚C至少可存放一年，避免反复冻融。

结构



运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。收到产品后放到-20 ºC保存。

应用浓度

1）Escherichia coli

E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差，但是转化子对Blasticidin S具有耐受性，可以用低盐LB培养基（pH 8）进行筛选，浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2）哺乳动物细胞
哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

一些哺乳动物细胞的建议工作浓度：

细胞

种属

组织

培养基

Blasticidin S浓度 (μg/ml)

HeLa

Human

Uterus

DMEM

3-10

293

Human

Kidney

DMEM

3-10

B16

Mouse

Melanoma

RPMI

3-10

PC1.0

Hamster

Adenocarcinoma

RPMI

10-30

Blasticidin S (10mg/ml in Solution) 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）操作步骤（哺乳动物稳转株筛选）

Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中，在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育，用于筛选稳定转染细胞株。

（1）转染后48h，用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代（注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%）；

（2）每3-4天去除培养基，加入含抗生素的新鲜培养基；

（3）7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要增加一周或更久。（4）转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中，加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

Blasticidin S (10mg/ml in Solution) 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）yb1436 rhTNF-α Vari 重组人肿瘤坏死因子-αVariant Recombinant Human Tumor Necrosis Factor- alpha Variant 10μg
yb1437 rhBAF 重组人B细胞活化因子 Recombinant Human B Cell Activating Factor 5μg
yb1438 rhOSM 重组人抑瘤素-M Recombinant Human Oncostatin-M 2μg
yb1439 rhOSM 209a.a. 重组人抑瘤素-M209a.a. Recombinant Human Oncostatin-M 209a.a. 2μg
yb1440 rhAK1-3 重组人血管抑素K1-3 Recombinant Human Angiostatin K1-3 10μg
yb1441 rhEndostatin 重组人血管内皮抑素 Recombinant Human Endostatin 2μg
yb1442 rhaFGF 重组人成纤维细胞生长因子--酸性 Recombinant Human Fibroblast Growth Factor- acidic 10μg
yb1443 rhbFGF 重组人成纤维细胞生长因子--碱性 Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-basic 10μg
yb1444 rhKGF-1 重组人角质细胞生长因子-1 Recombinant Human Keratinocye Growth Factor-1 2μg
yb1445 rhFGF-9 重组人成纤维细胞生长因子-9 Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-9 5μg
yb1446 rhKGF-2 重组人角质细胞生长因子-2 "Recombinant Human Keratinocye Growth Factor-2
" 5μg
yb1447 rhFGF-19 重组人成纤维细胞生长因子-19 "Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-19
" 5μg
yb1448 rhFGF-21 重组人成纤维细胞生长因子-21 "Recombinant Human Fibrobalst Growth Factor-21
" 5μg
yb1449 rhIGF-I 重组人IGF-I "Recombinant Human IGF-I
" 20μg
yb1450 rHuDES1-3/IGF1 重组人 DES1-3/ 胰岛样生长因子 -1 "Recombinant Human DES1-3/ Insulin-Like Growth factor 1
" 20μg
yb1451 rhIGF-BP3 重组人 IGF-BP3 "Recombinant Human IGF-BP3
" 5μg
yb1452 rhLR3IGF-1 重组人长R3胰岛样生长因子-1 "Recombinant Human Long R3 Insulin-like Growth factor-1
" 20μg
yb1453 rhEGF 重组人表皮生长因子 "Recombinant Human Epidermal Growth Factor
" 100μg
yb1454 rhVEGF165 重组人血管内皮生长因子165 "Recombinant Human VEGF165
" 2μg
yb1455 rhNT-4 重组人神经营养因子-4 "Recombinant Human Neurotrophin-4
" 2μg
yb1456 rhCNTF 重组人睫状神经营养因子 "Recombinant Human Ciliary Neurotrophic Factor
" 5μg
yb1457 rhNRG-1 重组人 NRG-1（表皮生长因子样结构域） "Recombinant Human NRG-1(EGF-like domain)
" 10μg
yb1458 rhErbB3-f 重组人ErbB3片段 "Recombinant Human ErbB3 Fragment
" 5μg
yb1459 rhBTC 重组人乙胞素 "Recombinant Human Betacellulin
" 5μg