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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件：
密封干燥保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Aureobasidin A（AbA）
- 库存：
1000
- 供应商：
钰博生物
Aureobasidin A（AbA）金担子素A产品描述
金担子素A（Aureobasidin A，AbA）是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素，具有很强的抗真菌能力。在较低的浓度下（0.1-0.5 μg/ml）即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括：出牙酵母（Saccharomyces cerevisiae）、粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（A. niger.）。作用机制在于AbA抑制了真菌生长所依赖的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而进一步杀死菌株。编码IPC合成酶的基因研究较多的有来自酿酒酵母菌的AUR1 基因，以及构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性。通过对这些编码基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性，如AUR1-C基因。
AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。AbA抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的AbA溶液，浓度为1 mg/ml。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度（见表1. AbA对各种酵母菌的最低抑菌浓度（MIC））。
Aureobasidin A（AbA）金担子素A
产品性质
分子式（Formula）
C60H92N8O11
分子量（Molecular weight）
1100
纯度（Purity）
≥95%
熔点（Melting point）
155-157℃
结构式（Structure）
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存。
Aureobasidin A（AbA）金担子素A
操作步骤（抗AbA的酵母转化系统）
1）加入0.5 ml过夜培养的酵母到50 ml YPD培养基中（配方：1L液体培养基含有10g yeast extract，20g polypeptone， 20g D-glucose；固体培养基另外加入2%琼脂；）。
2）30℃培养约6小时，测定OD660为1～2。使用二倍体时，测定OD660为2～4。
3）1,000×g离心5分钟。
4）用10 ml Solution A（配方：100 mM Lithium acetate，10 mM Tris-HCl pH 7.5，1 mM EDTA）悬浮沉淀，1,000×g离心5分钟。
5）用Solution A重悬沉淀，直到OD660为150。
6）在管内分取100 µl细胞悬浮液，30℃培养1小时。
7）加入5 µg载体（环状或线性DNA）和150 µg Carrier DNA，100℃加热10分钟，迅速冷却。
【注】：pAUR101需使用线性DNA进行转化。使用环状DNA会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112和pAUR123需使用完整的质粒DNA进行转化。
8）加入850 µl Solution B（配方：取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100 ml Solution A充分溶解，需要现用现配），轻轻混匀。
9）30℃培养30分钟后，42℃培养15分钟。
10）室温放置10分钟。
11）5,000 rpm离心1分钟，用5 ml YPD培养基悬浮沉淀。
12）30℃培养6小时~过夜。
13）5,000~10,000 rpm离心，用1-10 ml 0.9% NaCl悬浮沉淀。
14）在YPD选择培养基平板（含有一定浓度的AbA，依菌株类型而定）上接种100 µl细胞悬液。30℃培养3-4天后转化完成。
15）挑取阳性转化子，和/或测定转化效率（以每微克质粒DNA转化的菌落数来表示）。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）AbA的最佳工作浓度因宿主细胞不同而有差异，可根据最低抑菌浓度（MIC）来确定。
表1 Aureobasidin 对各种酵母菌的最低抑菌浓度
菌株
MIC（µg/ml）
S.cerevisiae
ATCC9763（diploid）
0.2-0.4
SH3328（haploid）
0.1
Sake yeast（diploid）
0.1-0.2
Shochu yeast（diploid）
0.1
Beer yeast（triploid or tetraploid）
0.1
Baker’s yeast（diploid）
0.2-0.4
Schizo.pombe
JY-745（monoploid）
0.1
C.albicans
TIMM-0136（diploid）
0.04
C.tropicalis
TIMM-0324（diploid）
0.08
Aureobasidin A（AbA）金担子素Ayb1218 ATCC
yb1219 脐带细胞系统 ATCC
yb1220 HUVEC 人脐静脉内皮细胞 Human Umbilical Vein Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1221 HUAEC 人脐动脉内皮细胞 Human Umbilical Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1222 HUVSMC 人脐静脉平滑肌细胞 Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1223 HUASMC 人脐动脉平滑肌细胞 Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1224 ATCC
yb1225 小鼠细胞系统 ATCC
yb1226 MPC 小鼠垂体细胞 Mouse Pituitary Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1227 MMenC 小鼠脑膜细胞 Mouse Meningeal Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1228 MN-r 小鼠脑脊神经元 Mouse Neurons-raphe 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1229 MN-c 小鼠皮质神经元 Mouse Neurons-cortical 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1230 MGC 小鼠颗粒细胞 Mouse Granule Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1231 MN-h 小鼠海马趾神经元 Mouse Neurons-hippocampal 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1232 MN-sn 小鼠黑质神经元 Mouse Neurons-substantia nigra 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1233 MN-s 小鼠纹状体神经元 Mouse Neurons-striatal 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1234 MN-vsc 小鼠腹脊髓神经元 Mouse Neurons-ventral spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1235 MN-dsc 小鼠背脊髓神经元 Mouse Neurons-dorsal spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1236 MN-sc 小鼠脊髓神经元 Mouse Neurons-spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1237 MOPC 小鼠少突胶质前体细胞 Mouse Oligodendrocyte Precursor Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1238 MSC 小鼠雪旺细胞 Mouse Schwann Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1239 MPNF 小鼠神经束膜细胞 Mouse Perineural Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
金担子素A（Aureobasidin A，AbA）是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素，具有很强的抗真菌能力。在较低的浓度下（0.1-0.5 μg/ml）即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括：出牙酵母（Saccharomyces cerevisiae）、粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、构巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（A. niger.）。作用机制在于AbA抑制了真菌生长所依赖的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，干扰鞘脂合成，从而进一步杀死菌株。编码IPC合成酶的基因研究较多的有来自酿酒酵母菌的AUR1 基因，以及构巢曲霉的AURA基因，两者具有同源性。通过对这些编码基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性，如AUR1-C基因。
AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。AbA抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的AbA溶液，浓度为1 mg/ml。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度（见表1. AbA对各种酵母菌的最低抑菌浓度（MIC））。
Aureobasidin A（AbA）金担子素A
产品性质
分子式（Formula）
C60H92N8O11
分子量（Molecular weight）
1100
纯度（Purity）
≥95%
熔点（Melting point）
155-157℃
结构式（Structure）
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存。
Aureobasidin A（AbA）金担子素A
操作步骤（抗AbA的酵母转化系统）
1）加入0.5 ml过夜培养的酵母到50 ml YPD培养基中（配方：1L液体培养基含有10g yeast extract，20g polypeptone， 20g D-glucose；固体培养基另外加入2%琼脂；）。
2）30℃培养约6小时，测定OD660为1～2。使用二倍体时，测定OD660为2～4。
3）1,000×g离心5分钟。
4）用10 ml Solution A（配方：100 mM Lithium acetate，10 mM Tris-HCl pH 7.5，1 mM EDTA）悬浮沉淀，1,000×g离心5分钟。
5）用Solution A重悬沉淀，直到OD660为150。
6）在管内分取100 µl细胞悬浮液，30℃培养1小时。
7）加入5 µg载体（环状或线性DNA）和150 µg Carrier DNA，100℃加热10分钟，迅速冷却。
【注】：pAUR101需使用线性DNA进行转化。使用环状DNA会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112和pAUR123需使用完整的质粒DNA进行转化。
8）加入850 µl Solution B（配方：取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100 ml Solution A充分溶解，需要现用现配），轻轻混匀。
9）30℃培养30分钟后，42℃培养15分钟。
10）室温放置10分钟。
11）5,000 rpm离心1分钟，用5 ml YPD培养基悬浮沉淀。
12）30℃培养6小时~过夜。
13）5,000~10,000 rpm离心，用1-10 ml 0.9% NaCl悬浮沉淀。
14）在YPD选择培养基平板（含有一定浓度的AbA，依菌株类型而定）上接种100 µl细胞悬液。30℃培养3-4天后转化完成。
15）挑取阳性转化子，和/或测定转化效率（以每微克质粒DNA转化的菌落数来表示）。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）AbA的最佳工作浓度因宿主细胞不同而有差异，可根据最低抑菌浓度（MIC）来确定。
表1 Aureobasidin 对各种酵母菌的最低抑菌浓度
菌株
MIC（µg/ml）
S.cerevisiae
ATCC9763（diploid）
0.2-0.4
SH3328（haploid）
0.1
Sake yeast（diploid）
0.1-0.2
Shochu yeast（diploid）
0.1
Beer yeast（triploid or tetraploid）
0.1
Baker’s yeast（diploid）
0.2-0.4
Schizo.pombe
JY-745（monoploid）
0.1
C.albicans
TIMM-0136（diploid）
0.04
C.tropicalis
TIMM-0324（diploid）
0.08
Aureobasidin A（AbA）金担子素Ayb1218 ATCC
yb1219 脐带细胞系统 ATCC
yb1220 HUVEC 人脐静脉内皮细胞 Human Umbilical Vein Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1221 HUAEC 人脐动脉内皮细胞 Human Umbilical Artery Endothelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1222 HUVSMC 人脐静脉平滑肌细胞 Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1223 HUASMC 人脐动脉平滑肌细胞 Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1224 ATCC
yb1225 小鼠细胞系统 ATCC
yb1226 MPC 小鼠垂体细胞 Mouse Pituitary Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1227 MMenC 小鼠脑膜细胞 Mouse Meningeal Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1228 MN-r 小鼠脑脊神经元 Mouse Neurons-raphe 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1229 MN-c 小鼠皮质神经元 Mouse Neurons-cortical 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1230 MGC 小鼠颗粒细胞 Mouse Granule Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1231 MN-h 小鼠海马趾神经元 Mouse Neurons-hippocampal 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1232 MN-sn 小鼠黑质神经元 Mouse Neurons-substantia nigra 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1233 MN-s 小鼠纹状体神经元 Mouse Neurons-striatal 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1234 MN-vsc 小鼠腹脊髓神经元 Mouse Neurons-ventral spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1235 MN-dsc 小鼠背脊髓神经元 Mouse Neurons-dorsal spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1236 MN-sc 小鼠脊髓神经元 Mouse Neurons-spinal cord 1 x 10^6 cells/vial ATCC
yb1237 MOPC 小鼠少突胶质前体细胞 Mouse Oligodendrocyte Precursor Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1238 MSC 小鼠雪旺细胞 Mouse Schwann Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
yb1239 MPNF 小鼠神经束膜细胞 Mouse Perineural Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
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