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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
密封干燥保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
RIPA Lysis Buffer (Strong)
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液产品描述
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris (pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,并含有sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。
-20℃保存,一年有效。尽量避免反复冻融,建议分装后使用。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3)用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(YEASEN CAT NO.20201ES76)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液使用说明:
(一) 培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液yb0877 人结肠直肠腺癌 NCI-H508 [H508]细胞
yb0878 人结肠腺癌细胞,SW480细胞
yb0879 人结肠腺癌细胞,SW480-EGFP-puro细胞
yb0880 人结肠腺癌细胞,SW480 [SW-480]细胞
yb0881 人结肠腺癌细胞,SW1116细胞
yb0882 人结肠腺癌细胞,RKO细胞
yb0883 人结肠腺癌细胞,LS180细胞
yb0884 人结肠腺癌细胞,LS 174T细胞
yb0885 人结肠腺癌细胞,HT-29细胞
yb0886 人结肠腺癌细胞,HCT-8细胞
yb0887 人结肠腺癌细胞,CW-2细胞
yb0888 人结肠腺癌细胞,CaCo2细胞
yb0889 人结肠腺癌肺转移细胞,T84细胞,
yb0890 人结肠癌转基因细胞,RKO-E6细胞
yb0891 人结肠癌转基因细胞,RKO-AS45-1细胞
yb0892 人结肠癌细胞株 HT29细胞
yb0893 人结肠癌细胞(低分化)RKO细胞
yb0894 人结肠癌细胞,T84细胞
yb0895 人结肠癌细胞,SW620细胞
yb0896 人结肠癌细胞,SW620-EGFP-puro细胞
yb0897 人结肠癌细胞,SW480细胞
yb0898 人结肠癌细胞,SW403细胞
yb0899 人结肠癌细胞,SW1116细胞
yb0900 人结肠癌细胞,RKO细胞
yb0901 人结肠癌细胞,Ls-174-T细胞
yb0902 人结肠癌细胞,LS174T细胞
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
RIPA裂解液的主要成分为50mM Tris (pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,并含有sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。
-20℃保存,一年有效。尽量避免反复冻融,建议分装后使用。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3)用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(YEASEN CAT NO.20201ES76)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液使用说明:
(一) 培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液yb0877 人结肠直肠腺癌 NCI-H508 [H508]细胞
yb0878 人结肠腺癌细胞,SW480细胞
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yb0896 人结肠癌细胞,SW620-EGFP-puro细胞
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yb0901 人结肠癌细胞,Ls-174-T细胞
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