BES, Free Acid N,N-双(2-羟乙基)-2

BES, Free Acid N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸产品描述

2-[N,N-Bis(2-hydroxyethyl)amino] ethanesulfonic acid，缩写为BES，中文名N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸，是生物化学和分子生物学中常用的一种两性缓冲试剂，是1960s开发出来的可提供缓冲范围为pH 6.15-8.35的“Good”缓冲组分之一。BES的有效pH缓冲范围为6.4-7.8，pKa=7.1 （25℃），适用于制备磷酸钙-DNA复合物的实验体系。文献报道BES缓冲液为质粒DNA稳定转化进入细胞提供了更好的转染环境。

BES, Free Acid N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸产品性质

中文别名（Chinese Synonym）

2-(二乙醇氨基)乙磺酸；N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸；

英文别名（English Synonym）

N,N-bis(2-hydro xyethyl)taurine; 2-[N,N-Bis(2-hydroxyethyl)amino] ethanesulfonic acid;

N,N-Bis-(2-hydroxyethyl)-2-aminoethanesulfonic acid;

CAS号（CAS NO.）

10191-18-1

分子式（Formula）

CR6RHR15RNOR5RS

分子量（Molecular Weight）

213.25

熔点（Melting Point）

152-156℃

有效缓冲范围（Useful Buffering Range）

pH 6.4-7.8 (25℃)

外观（Appearance）

白色固体

纯度（Purity）

≥99%

溶解性（Solubility）

溶于水（500mg/ml）

结构式（Structure）





运输和保存方法

室温运输和保存即可。

注意事项

1） 本品对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2） BES或者其他的两性离子缓冲体系可能会影响BCA法对μg水平蛋白的定量分析，因其会降低BCA-蛋白复合物的颜色生成。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

运输和保存方法

冰袋运输。

收到产品后，取出除菌套装室温保存，其他组分4℃保存。甲臜溶解液也可以放到室温保存。一年有效。

注意事项

1) 甲臜溶解液具有腐蚀性和毒性，使用时注意防护。

2) MTT有致癌性，应小心操作；MTT溶液需要无菌，因其对菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超过1周，因其可能发生降解，导致检测结果错误。

3) MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7范围内。

4) 使用微孔板进行检测，如果细胞培养时间比较长，需要注意蒸发的问题。一般情况，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，建议弃用周围一圈的方法，改加PBS，水或者细胞培养液等。也可通过将96孔板放在靠近培养箱内水源的位置，以减缓蒸发现象。

5) 甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混匀后即可使用。

6) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BES, Free Acid N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸使用方法（以96孔板为例）

细胞生长的培养条件会影响检测效果，因此进行MTT检测时需考虑这些条件，包括：培养时间，传代次数以及生长培养基的成分等。一般情况，48-72h培养时间下，最初铺板的细胞密度可控制在5×103~5×104/100μl。也可根据细胞大小，增殖速度的快慢来优化最初的细胞铺板密度以及培养时间。

注意：1）最终检测的培养液内含有酚红会严重影响检测结果。推荐MTT检测时细胞培养在无酚红环境下。也可以在进行MTT孵育的时候改用无酚红培养液。2）每次实验都要设置空白对照孔（不含细胞）。对于细胞毒性试验，还要设置未经药物处理的细胞孔，此对照孔的吸光度范围一般控制在0.75-1.25之间；每个样品孔建议做三个平行。

A．实验前试剂准备

1. MTT溶液

用5ml MTT溶剂直接溶解25mg MTT粉末配制成5mg/ml的工作液，用试剂盒内提供的除菌套装以除去溶液中的细菌，该溶液可4℃ 避光短时间保存（越短越好）。建议溶解后，直接将剩余液体小剂量分装放到-20℃保存，避免反复冻融，6个月稳定。

2） 甲臜溶解液（MTT终止液）

甲臜溶解液低温或者常温保存可能会产生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混匀后即可使用。

B．MTT细胞增殖检测

1） 接种细胞：用含10%胎牛血清（FBS）的培养液配制成单个细胞悬液，调整细胞密度，以每孔5×103~5×104个细胞接种到96孔板，每孔体积100µl，培养板的边缘孔用无菌PBS，水或者培养液填充。设置空白对照孔（不含有细胞）。

2） 37℃，5% CO2，培养24-72h。

3） 可选：对于贴壁细胞，去除旧的培养液，更换100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）；对于悬浮细胞，离心96孔板，去除尽可能多的上清液。然后加入100µl/孔新鲜的培养液（不含酚红）重悬细胞；

4） 每孔加入10µl MTT工作液（5 mg/ml），加样时尽量勤换枪头，控制加量误差。

5） 水平摇床上低速混匀1 min后，放入37℃培养箱孵育4h。注：对于高密度的细胞（>100,000 cells/孔）可缩短孵育时间至2h。

6） 对于贴壁细胞，直接吸掉旧的培养液，避免枪尖刮破单细胞层。对于悬浮细胞，离心收集细胞，去除培养液。

7） 加入100µl/孔甲臜溶解液，用枪充分混匀后放入37℃培养箱孵育4 h。注：更长的孵育时间会降低检测灵敏度。

8） 孵育结束，放置在酶标仪上摇匀后，选择570nm，测定吸光度。记录结果，比色以空白调零。如果无570nm滤光片，可以使用560-600nm滤光片。
BES, Free Acid N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸yb-hxbz-147 人小细胞肺癌细胞 NCI-H345 规格25毫升/株.
yb-hxbz-148 人小细胞肺癌细胞 DMS153 规格25毫升/株.
yb-hxbz-149 人经典小细胞肺癌细胞 NCI-H1688 规格25毫升/株.
yb-hxbz-150 人大细胞肺癌细胞 NCI-H460 规格25毫升/株.
yb-hxbz-151 人大细胞肺癌细胞 NCI-H661 规格25毫升/株.
yb-hxbz-152 人肺鳞癌细胞 NCI-H520 规格25毫升/株.
yb-hxbz-153 人肺支气管癌细胞 NCI-H1650 规格25毫升/株.
yb-hxbz-154 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H157 规格25毫升/株.
yb-hxbz-155 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H1975 规格25毫升/株.
编号 中文 英文名称 报价
yb-hxbz-156 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H838 规格25毫升/株.
yb-hxbz-157 人肺小细胞肺癌 NCI-H2227 规格25毫升/株.
yb-hxbz-158 人肺癌细胞（淋巴结转移） NCI-H292 规格25毫升/株.
yb-hxbz-159 人肺腺鳞癌细胞 NCI-H596 规格25毫升/株.
yb-hxbz-160 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23 规格25毫升/株.
yb-hxbz-161 人非小细胞肺腺癌细胞 NCI-H2087 规格25毫升/株.
yb-hxbz-162 人肺腺癌细胞 A549 规格25毫升/株.
yb-hxbz-163 人肺癌细胞 A-427 规格25毫升/株.
yb-hxbz-164 人肺癌细胞 H125 规格25毫升/株.
yb-hxbz-165 人肺巨细胞癌 PG 规格25毫升/株.
yb-hxbz-166 耐DDP肺癌细胞 A549/DDP 规格25毫升/株.
yb-hxbz-167 人肺扁平上皮癌细胞 QG-56 规格25毫升/株.
yb-hxbz-168 人高转移肺癌细胞 95-D 规格25毫升/株.
yb-hxbz-169 人巨细胞性肺癌细胞 801-D 规格25毫升/株.
yb-hxbz-170 人肺腺癌细胞 SPC-A1 规格25毫升/株.
yb-hxbz-171 人肺腺癌细胞 LTPEP-a-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-172 人肺腺癌细胞 LTEP-a-2 规格25毫升/株.
yb-hxbz-173 人肺腺癌细胞 H1299 规格25毫升/株.
yb-hxbz-174 人肺鳞癌细胞 SK-MES-1 规格25毫升/株.