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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃保存
- 保质期:
有效期2年
- 英文名:
Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
10mL
产品信息
产品描述
Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1EU/ml,且样品回收率高。
产品性质
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。
平衡液:20mM 磷酸盐缓冲液,150mM NaCl,pH7.4
再生液:1% Triton X-114
【注】:结合液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7-8,NaCl约150mM-500mM。
使用方法
【注】a 样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;
b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9,因此样品pH最好控制在7-8;
c 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,约150mM-500mM。
样品纯化(以1ml树脂为例)
1)装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉保护液,用3ml再生液进行清洗,控制流速在0.25ml/min,或<10滴/min。重复至少2次,确保柱中无内毒素。
2)平衡:用3ml的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5ml/min,重复至少两次。
3)过柱及检测:将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25ml/min,或<10滴/min,当流出液流出约1ml 时,开始收集流出液,流干后加入1ml平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。
【注】:如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。
注意事项
1)本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M尿素,300mM咪唑;0.05% Tween 20,10mM DTT等。
相关产品
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
| Endotoxin Removal Agarose Resin, High Performance内毒素高效去除纯化树脂 | 20518ES10 | 10ml | 4℃ | 1858.00 |
Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1EU/ml,且样品回收率高。
产品性质
| 基质(Matrix) | 4%琼脂糖微球 |
| 配体(Ligand) | 修饰过的多粘菌素B |
| 孔径(Bead size) | 45-165µm |
| 载量(Capacity) | >2000000EU/ml基质 |
| 最大压力(PressureMax) | 0.1 MPa, 1bar |
| pH稳定范围(pH range) | 5-10 |
| 储存缓冲液(Buffer) | 20%乙醇 |
冰袋运输。4℃保存,有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。
平衡液:20mM 磷酸盐缓冲液,150mM NaCl,pH7.4
再生液:1% Triton X-114
【注】:结合液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7-8,NaCl约150mM-500mM。
使用方法
【注】a 样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;
b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9,因此样品pH最好控制在7-8;
c 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,约150mM-500mM。
样品纯化(以1ml树脂为例)
1)装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉保护液,用3ml再生液进行清洗,控制流速在0.25ml/min,或<10滴/min。重复至少2次,确保柱中无内毒素。
2)平衡:用3ml的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5ml/min,重复至少两次。
3)过柱及检测:将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25ml/min,或<10滴/min,当流出液流出约1ml 时,开始收集流出液,流干后加入1ml平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。
【注】:如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。
注意事项
1)本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M尿素,300mM咪唑;0.05% Tween 20,10mM DTT等。
- )为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 内毒素去除效率低 | 样品pH值不在内毒素结合范围内 | 用0.1MNaOH或0.1M HCl调节至pH7-8 |
| 样品与树脂接触时间短 | 减少流速,增加样品接触时间 | |
| 去除或检测系统被内毒素污染 | 所有试验用品均需无热源产品 | |
| 内毒素与目的蛋白结合较强 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 | |
| 样品被污染 | 树脂纯化过其他样品 | 不用使用过的树脂去除不同样品内毒素 |
| 样品回收率低 | 样品非特异性吸附在树脂上 | 增加样品和平衡液的NaCl浓度 |
| 目的蛋白与内毒素结合一起 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 |
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[2] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
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[2] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
[3] Wu J, Yang H, Xu JC, et al. Mycobacterium tuberculosis Rv3628 isan effective adjuvant via activationof dendritic cells for cancer immunotherapy. Mol Ther Oncolytics. 2021;23:288-302. Published 2021 Oct 20. doi:10.1016/j.omto.2021.10.003(IF:7.200)
[4] Hassan Z, Wang J, Qin Y, et al. Functional characterization of an interleukin 20 like homologue in grass carp Ctenopharyngodon idella. Fish Shellfish Immunol. 2021;115:43-57. doi:10.1016/j.fsi.2021.05.009(IF:4.581)
[5] Zhang A, Jian X, Wang D, Ren J, Wang X, Zhou H. Characterization and bioactivity of grass carp (Ctenopharyngodon idella) interleukin-21: Inducible production and involvement in inflammatory regulation. Fish Shellfish Immunol. 2020;99:19-26. doi:10.1016/j.fsi.2020.01.059(IF:4.581)
[6] Qiu X, Wang D, Lv M, et al. Identification and functional characterization of interleukin-12 receptor beta 1 and 2 in grass carp (Ctenopharyngodon idella). Mol Immunol. 2022;143:58-67. doi:10.1016/j.molimm.2022.01.007(IF:4.407)
[7] Yin L, Ren J, Wang D, et al. Functional characterization of three fish-specific interleukin-23 isoforms as regulators of Th17 signature cytokine expression in grass carp head kidney leukocytes. Fish Shellfish Immunol. 2019;92:315-321. doi:10.1016/j.fsi.2019.06.028(IF:3.298)
[8] Zang L, Wang J, Ren Y, et al. Activated toll-like receptor 4 is involved in oridonin-induced phagocytosis via promotion of migration and autophagy-lysosome pathway in RAW264.7 macrophages. Int Immunopharmacol. 2019;66:99-108. doi:10.1016/j.intimp.2018.11.014(IF:3.118)
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