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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海古朵生物有限公司
- 检测范围:
科研
- 检测方法:
酶联检测
- 适应物种:
小鼠
- 规格:
48T/96T
高灵敏度促甲状腺激素ELISA
货号:GD-NB3088
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
高灵敏度促甲状腺激素ELISA操作步骤:
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
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文献和实验一、基本原理 先将标准物或血样品与抗血清混匀,免疫反应6~24h,使抗原与抗体充分结合,甚至达到平衡,然后再加入标记抗原,与抗体反应12~24h,最后分离B与F,这称为顺序饱和分析法。 应用顺序饱和加样,可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素(TSH)放射免疫分析时,将标记物延至第2天加入,发现其灵敏度增加两倍。如果缩短最后的温育时间,仍可取得满意的结果。所以一般认为,在顺序饱和加样中,第1次温育时间可以长,而第2次温育时间要短,这样可以提高灵敏度。但也有相反的意见,认为
作用 三、AD蛋白标志物的检测 1、常规方法 用于鉴定 AD 蛋白标志物的常规方法主要包括酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印迹(WB)和质谱法(MS)等,主要针对 Aβ 和 tau 蛋白的检测。 ① ELISA 相对来说操作最为简单,但是存在灵敏度低,易出现假阳性的缺点; ② WB 灵敏度相对较高,但设备昂贵,操作耗时; ③ MS 是三者中灵敏度最高的检测手段,但同样存在设备昂贵,操作耗时的问题。 2、生物传感器 通过结合常规方法,生物传感器可以在体内或体外环境中以高灵敏度
-timeimmuno-PCR的基本原理 real-timeimmuno-PCR主要由两个部分组成。第一部分是类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应。第二部分即荧光定量PCR。real-timeimmuno-PCR与ELISA的区别就在于ELISA是以碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶来标记抗体,用颜色反应来表明阳性或阴性结果,而前者是以一段特定的双链或单链DNA来标记抗体,用PCR扩增抗体所连接的DNA,因此可由PCR产物的量来反映抗原分子的量。由于荧光定量PCR的高灵敏度,只要存在着极微量的抗原
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