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- GD-NB6035
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海古朵生物有限公司
- 检测范围：
科研
- 检测方法：
酶联检测
- 适应物种：
小鼠
- 规格：
48T/96T
嗜酸粒细胞趋化因子ELISA
货号：GD-NB6035
规格:48T/96T
运输条件:2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
嗜酸粒细胞趋化因子ELISA操作步骤：
1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。
7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。
10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
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文献和实验一、趋化因子 由组织细胞和微生物产生的趋化剂（chemoattractants)对白细胞的趋化作用（chemotaxis)是炎症发生过程中重要的起始步骤，也是机体防御和清除入侵病原体等异物先天性免疫功能的一个重要方面。1986年以前，“经典”的（classical)白细胞趋化物质主要有补体片段C5a、白三烯B4（leukotrinin B4,LTB4)、血小板激活因子（platelet-activating factor,PAF
发现它是HIV感染T细胞的一种协同受体。CXCR5表达于成熟的B细胞表面。SCID鼠由于缺乏成熟的B细胞，脾脏内的CXCR5的水平大大降低。CXCR6主要表达于NKT细胞和活化的工型CD4T细胞和CD8T细胞。 2.CCR趋化因子受体 CCR／基因位于人染色体3p21，成熟分子含355个氨基酸残基，配体为MIP―l。和RAN―TE5；CC只1主要表达于单核细胞、中性粒细胞、T细胞、B细胞和嗜酸粒细胞，以及肺、肝等组织，类风湿关节炎患者的外周血和关节滑液中也检出CCRl。CCR2主要与MIP
趋化因子及其受体 趋化因子(chemokine)是一组小分子质量(8―1lkDa)蛋白的集合，是细胞因子家族中惟一作用于G蛋白偶联受体超家族的成员。它们直接参与白细胞特别是吞噬细胞和淋巴细胞的游走和活化，参与炎症反应并在其中起核心作用。趋化因子还具有其他多效性功能，如对肿瘤生长的调节，参与免疫系统、循环系统和神经系统的发育等。 迄今发现的人的趋化因子约有50种。趋化因子的序列相似性较低，但是三维空间结构存在显著的同源性。它们都是单链蛋白，拥有相同的单体
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