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- HL1362
- 2025年07月12日
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英文名称：Lecithin Tween 80 Nutrient Agar
规格：250g
卵磷脂吐温80营养琼脂产品说明与用途：用于化妆品细菌总数测定（GB标准）
卵磷脂吐温80营养琼脂使用操作规程：
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
本文由卵磷脂吐温80营养琼脂生产厂家上海哈灵生物科技有限公司提供 www.sh-haling.com
卵磷脂吐温80营养琼脂实验内容：
1．仪器与试剂：
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞，用牛皮纸包好，扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入实验冰箱，备用（实验冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3.使用时从实验冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立马塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
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文献和实验菌种活化：干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株； 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株： 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中，划线接种于营养琼脂平板上，36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌：菌落凸起，圆形，不透明； b. 大肠埃希氏菌：菌落稍凸，圆形，湿润，乳白色； c. 铜绿假单胞菌：菌落扁平，圆形，边缘不整齐，光滑湿润，可产生蓝绿或黄绿色素； d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
。 二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物（Mixed culture）。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（Pure culture）。在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。 1、倾注平板法 首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在40~50°左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。单一
水 1000ml pH 7.0 123、尿囊素无机盐培养基 (DSM 6) K2HPO4 0.8g KH2PO4 0.2g MgSO4.7H2O 0.5g CaCl2.2H2O 0.05g FeSO4.7H2O 0.01g MnSO4.H2O 1.0mg 尿囊素（Allantion） 20.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml 124、碱性营养琼脂培养基 （DSM 31） 蛋白胨 5.0g 牛肉膏 3.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 1000ml 灭菌后,加入无菌的1M Na
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