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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃保存
- 保质期:
有效期5年
- 英文名:
SuRi rProtein A Agarose Resin
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
5mL
产品信息
|
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
|
耐碱rProtein A Agarose Resin 耐碱重组Protein A琼脂糖纯化树脂 |
36401ES08 |
5 mL |
900.00 |
|
36401ES25 |
25 mL |
2800.00 |
|
|
36401ES60 |
100 mL |
9500.00 |
天然蛋白A(Protein A)是一种发现于金黄-色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白,与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样(详见附录1)。
本品使用的是基因改造后的蛋白A,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,耐碱rProtein A Agarose Resin 以琼脂糖凝胶为基质,修饰的耐碱重组Protein A为配基,具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
产品性质
| 基质(Matrix) | 4%高度交联的琼脂糖微球 |
| 配体(Ligand) | 耐碱重组 Protein A |
| 孔径(Bead size) | 90 µm |
| 耐压(MPa) | 0.3 MPa |
| 储存缓冲液(Buffer) | 含20%乙醇的1×PBS |
| 载量(Capacity) | 50 mg/mL |
| 耐碱性(alkali resistance) | 0.1-0.5M NaOH |
保存方法
2~8℃保存,有效期5年。
注意事项
- 请勿冷冻保存本产品。
- Protein A琼脂糖珠使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
- 所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途!
使用方法
1缓冲液的配制
建议以下缓冲液在使用前用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤。
平衡/结合/洗杂缓冲液:0.15 M NaCl,20 mM Na2HPO4,pH7.0
洗脱缓冲液:0.1 M甘氨酸,pH 3.0
中和液:1 M Tris-HCl,pH 8.5
2 样品准备
上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用结合/洗杂缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用结合/洗杂缓冲液透析。
3 装柱
将耐碱rProtein A Agarose Resin装入合适的层析空柱中,注意避免产生气泡。
4 样品纯化
1)平衡:用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)上样:将样品加到平衡好的rProtein A Agarose Resin中,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
3)洗杂: 用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
4)洗脱: 使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
5)CIP清洗及保存:一般使用大于 3CV 的 0.1-0.5 M NaOH,接触时间为 15 min;然后用 5CV 的平衡液冲洗至中性。最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。
5 SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。
| 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G | 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G |
| Human IgG | ++++ | ++++ | Mouse IgG | ++++ | ++++ |
| Human IgG1 | ++++ | ++++ | Mouse IgG1 | + | ++++ |
| Human IgG2 | ++++ | ++++ | Mouse IgG2a | ++++ | ++++ |
| Human IgG3 | + | ++++ | Mouse IgG2b | +++ | +++ |
| Human IgG4 | ++++ | ++++ | Mouse IgG3 | ++ | +++ |
| Human IgM | Use anti-Human IgM | Mouse IgM | Use anti-Mouse IgM | ||
| Human IgE | NR | NR | Chicken IgG (IgY) | NR | NR |
| Human IgA | + | NR | Cow IgG | ++ | ++++ |
| Human IgA1 | + | NR | Goat IgG | + | ++ |
| Human IgA2 | + | NR | Goat IgG1 | + | ++++ |
| Human IgD | Use anti-Human IgD | Goat IgG2 | ++++ | ++++ | |
| Rat IgG | + | ++ | Goat IgM | NR | NR |
| Rat IgG1 | NR | + | Guinea Pig IgG | ++++ | ++ |
| Rat IgG2a | NR | ++++ | Guinea Pig IgG1 | ++++ | ++ |
| Rat IgG2b | NR | + | Guinea Pig IgG2 | ++++ | ++ |
| Rat IgG3 | + | ++ | Hamster IgG | + | ++ |
| Sheep IgG | + | ++ | Horse IgG | ++ | ++++ |
| Sheep IgG1 | + | ++ | Rabbit IgG | ++++ | +++ |
| Sheep IgG2 | + | ++ | Rabbit IgM | NR | NR |
| Sheep IgM | NR | NR | Rabbit All isotypes | +++ | ++ |
| Pig IgG | +++ | +++ | Monkey IgG | ++++ | ++++ |
| Cat IgG | ++++ | + | |||
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文献和实验[2] Wang Y, Ding Y, Li C, Gao J, Wang X, An H. Alpha-linolenic acid inhibits IgE-mediated anaphylaxis by inhibiting Lyn kinase and suppressing mast cell activation. Int Immunopharmacol. 2022;103:108449. doi:10.1016/j.intimp.2021.108449(IF:4.932)
Resin Technologies: Construction and Staining of Resin TMAs
the issue of antigenicity, frozen tissue suffers from a lack of morphology. We have demonstrated that tissue microarrays constructed in glycol methacrylate resin, when combined with a cold acetone fixation step, have been able to combine the superior
them down and continue. These pellets do not hold together very well so tke care that they do not fall apart in the resin. 12). Leave in fresh propylene oxide for 20' then in propylene oxide/Spurr's resin (1:1 mix) overnight. Mixing during the incubation will help
指植物体的分泌物或从伤口流出物而生成的精油一类的物质之总称。主要由倍半萜(烯)、双萜、三萜,或此类物质的羟基衍生物的混合物构成。与植物树胶不同,而树脂不溶于水,可溶于乙醇。通常是与精油混合而分泌的,在空气中,精油的一部分挥发或氧化,逐渐增加粘度而固体化。由于含大量精油而呈现液体的称为枞胶(balsam)或含油树脂(oleore-sin),松脂即其一种。在水蒸汽蒸馏下,分离为精油(从松脂分离的是松节油)和固形树脂(松脂或精制松脂)。另外还有乳液状分泌物(漆)等。树脂埋在地下化石
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