- ￥518
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 36405ES08
- 2026年02月20日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 保存条件：
4℃保存
- 保质期：
有效期2年
- 英文名：
Protein G Agarose Resin
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
5mL
产品描述天然蛋白G（Protein G）是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白，与发现于金-黄|色葡萄{球菌}的细胞壁表面的蛋白A类似，主要通过与免疫球蛋白（Ig）的Fc区相互作用，结合大多数哺乳动物的IgG，可用于多种抗体（单抗和多抗）的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上，ProteinA 和Protein G结合性能不太一样，相比ProteinA， ProteinG 对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力，它还可以结合不能与ProteinA很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1（详见附录1）。
本品使用的是基因改造后的蛋白G，不仅维持其本身的Ig亲和特性，同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合，rProtein G Agarose Resin以琼脂糖凝胶为基质，重组Protein G为配基，具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体，使用方便，应用广泛。
产品性质
保存方法2~8℃保存，有效期2年。
需准备试剂【注】建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
结合/洗杂缓冲液：0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0
洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，pH 3.0
中和液：1M Tris-HCl，pH 8.5
本品使用的是基因改造后的蛋白G，不仅维持其本身的Ig亲和特性，同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合，rProtein G Agarose Resin以琼脂糖凝胶为基质，重组Protein G为配基，具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体，使用方便，应用广泛。
产品性质
| 基质（Matrix） | 高度交联的4%琼脂糖微球 |
| 配体（Ligand） | 重组蛋白G |
| 孔径（Bead size） | 45-165µm |
| 最大流速（Flowmax） | 0.3 MPa, 3 bar |
| 储存缓冲液（Buffer） | 含20%乙醇的1×PBS |
| 载量（Capacity） | ＞30mg human IgG/ml 基质 |
| pH范围（pH range） | 3-10 |
保存方法2~8℃保存，有效期2年。
需准备试剂【注】建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
结合/洗杂缓冲液：0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0
洗脱缓冲液：0.1M甘氨酸，pH 3.0
中和液：1M Tris-HCl，pH 8.5
使用方法【注】上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释，或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。
1 rProtein G Agarose Resin的装填
将rProtein G Agarose Resin装入合适的层析柱中，注意避免产生气泡。
2 样品纯化
1）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
2）上样：将样品加到平衡好的rProtein G Agarose Resin中，保证目的蛋白与树脂充分接触，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待检测。
3）洗杂： 用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
4）洗脱： 使用 5-10 倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。
5）清洗及保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的 20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。
3 SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。
4 树脂清洗
随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量下降，影响柱子的性能，这时需对柱子进行清洗：
1）去除沉淀或变性物质
① 用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗；
② 用5倍柱体积的PBS，pH 7.4 清洗。
2）去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质
① 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™X-100清洗；
② 用5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。
注意事项
1 rProtein G Agarose Resin的装填
将rProtein G Agarose Resin装入合适的层析柱中，注意避免产生气泡。
2 样品纯化
1）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
2）上样：将样品加到平衡好的rProtein G Agarose Resin中，保证目的蛋白与树脂充分接触，提高目的蛋白的回收率，收集流出液，待检测。
3）洗杂： 用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
4）洗脱： 使用 5-10 倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。
5）清洗及保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的 20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。
3 SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。
4 树脂清洗
随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量下降，影响柱子的性能，这时需对柱子进行清洗：
1）去除沉淀或变性物质
① 用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗；
② 用5倍柱体积的PBS，pH 7.4 清洗。
2）去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质
① 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™X-100清洗；
② 用5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。
注意事项
- 请勿冷冻保存本产品。
- Protein G琼脂糖珠使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
- 所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途！
| 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G | 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G |
| Human IgG | ++++ | ++++ | Mouse IgG | ++++ | ++++ |
| Human IgG1 | ++++ | ++++ | Mouse IgG1 | + | ++++ |
| Human IgG2 | ++++ | ++++ | Mouse IgG2a | ++++ | ++++ |
| Human IgG3 | + | ++++ | Mouse IgG2b | +++ | +++ |
| Human IgG4 | ++++ | ++++ | Mouse IgG3 | ++ | +++ |
| Human IgM | Use anti-Human IgM | Mouse IgM | Use anti-Mouse IgM | ||
| Human IgE | NR | NR | Chicken IgG (IgY) | NR | NR |
| Human IgA | + | NR | Cow IgG | ++ | ++++ |
| Human IgA1 | + | NR | Goat IgG | + | ++++ |
| Human IgA2 | + | NR | Goat IgG1 | + | ++++ |
| Human IgD | Use anti-Human IgD | Goat IgG2 | ++++ | ++++ | |
| Rat IgG | + | ++ | Goat IgM | NR | NR |
| Rat IgG1 | NR | + | Guinea Pig IgG | ++++ | ++ |
| Rat IgG2a | NR | ++++ | Guinea Pig IgG1 | ++++ | ++ |
| Rat IgG2b | NR | + | Guinea Pig IgG2 | ++++ | ++ |
| Rat IgG3 | + | ++ | Hamster IgG | + | ++ |
| Sheep IgG | + | ++ | Horse IgG | + | ++++ |
| Sheep IgG1 | + | ++ | Rabbit IgG | ++++ | +++ |
| Sheep IgG2 | + | ++ | Rabbit IgM | NR | NR |
| Sheep IgM | NR | NR | Rabbit All isotypes | +++ | ++ |
| Pig IgG | +++ | +++ | Monkey IgG | ++++ | ++++ |
| Cat IgG | ++++ | + | Donkey IgG | ||
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文献和实验该产品被引用文献
[1] Yang L, Gu W, Cheung KH, et al. InsP3R-SEC5 interaction on phagosomes modulates innate immunity to Candida albicans by promoting cytosolic Ca2+ elevation and TBK1 activity [published correction appears in BMC Biol. 2020 Nov 2;18(1):158]. BMC Biol. 2018;16(1):46. Published 2018 Apr 27. doi:10.1186/s12915-018-0507-6(IF:5.770)
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蛋白G琼脂糖纯化树脂(rProtein G Agarose Resin)
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