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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃保存
- 保质期:
有效期2年
- 英文名:
Protein G Agarose Resin
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
5mL
本品使用的是基因改造后的蛋白G,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,rProtein G Agarose Resin以琼脂糖凝胶为基质,重组Protein G为配基,具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
产品性质
| 基质(Matrix) | 高度交联的4%琼脂糖微球 |
| 配体(Ligand) | 重组蛋白G |
| 孔径(Bead size) | 45-165µm |
| 最大流速(Flowmax) | 0.3 MPa, 3 bar |
| 储存缓冲液(Buffer) | 含20%乙醇的1×PBS |
| 载量(Capacity) | >30mg human IgG/ml 基质 |
| pH范围(pH range) | 3-10 |
保存方法2~8℃保存,有效期2年。
需准备试剂【注】建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
结合/洗杂缓冲液:0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0
洗脱缓冲液:0.1M甘氨酸,pH 3.0
中和液:1M Tris-HCl,pH 8.5
1 rProtein G Agarose Resin的装填
将rProtein G Agarose Resin装入合适的层析柱中,注意避免产生气泡。
2 样品纯化
1)平衡:用5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)上样:将样品加到平衡好的rProtein G Agarose Resin中,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
3)洗杂: 用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
4)洗脱: 使用 5-10 倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
5)清洗及保存:依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的 20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。
3 SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。
4 树脂清洗
随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量下降,影响柱子的性能,这时需对柱子进行清洗:
1)去除沉淀或变性物质
① 用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗;
② 用5倍柱体积的PBS,pH 7.4 清洗。
2)去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质
① 用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™X-100清洗;
② 用5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。
注意事项
- 请勿冷冻保存本产品。
- Protein G琼脂糖珠使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
- 所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途!
| 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G | 免疫球蛋白亚型 | Protein A | Protein G |
| Human IgG | ++++ | ++++ | Mouse IgG | ++++ | ++++ |
| Human IgG1 | ++++ | ++++ | Mouse IgG1 | + | ++++ |
| Human IgG2 | ++++ | ++++ | Mouse IgG2a | ++++ | ++++ |
| Human IgG3 | + | ++++ | Mouse IgG2b | +++ | +++ |
| Human IgG4 | ++++ | ++++ | Mouse IgG3 | ++ | +++ |
| Human IgM | Use anti-Human IgM | Mouse IgM | Use anti-Mouse IgM | ||
| Human IgE | NR | NR | Chicken IgG (IgY) | NR | NR |
| Human IgA | + | NR | Cow IgG | ++ | ++++ |
| Human IgA1 | + | NR | Goat IgG | + | ++++ |
| Human IgA2 | + | NR | Goat IgG1 | + | ++++ |
| Human IgD | Use anti-Human IgD | Goat IgG2 | ++++ | ++++ | |
| Rat IgG | + | ++ | Goat IgM | NR | NR |
| Rat IgG1 | NR | + | Guinea Pig IgG | ++++ | ++ |
| Rat IgG2a | NR | ++++ | Guinea Pig IgG1 | ++++ | ++ |
| Rat IgG2b | NR | + | Guinea Pig IgG2 | ++++ | ++ |
| Rat IgG3 | + | ++ | Hamster IgG | + | ++ |
| Sheep IgG | + | ++ | Horse IgG | + | ++++ |
| Sheep IgG1 | + | ++ | Rabbit IgG | ++++ | +++ |
| Sheep IgG2 | + | ++ | Rabbit IgM | NR | NR |
| Sheep IgM | NR | NR | Rabbit All isotypes | +++ | ++ |
| Pig IgG | +++ | +++ | Monkey IgG | ++++ | ++++ |
| Cat IgG | ++++ | + | Donkey IgG | ||
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文献和实验相关专题 学生物的人对琼脂 、琼脂糖这两个词一定都不会陌生。不过它们是同一样东西抑或有所差别呢?我想不少人都会犯迷糊了。没关系,且听我细细讲来。 首先,琼脂和琼脂糖不光中文叫法有点区别,它们的英文名字也是不同的。先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。而琼脂糖的英文名为agarose,天然琼脂agar由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成
把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用 sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用 5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。利用其吸附性小的特点,有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
Recovering DNA from agarose gelsPaul N. Hengen, Ph.D. (July 14, 1999)IntroductionMethods and reagents is a unique monthly column that highlights current discussions in the newsgroup bionet.molbio.methds-reagnts, available on the internet. A commonly










