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蛋白G琼脂糖纯化树脂(rProtein G Agarose

Resin)
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  • ¥518
  • 翌圣生物(Yeasen)已认证
  • 上海
  • 36405ES08
  • 2025年10月25日
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      4℃保存

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      有效期2年

    • 英文名

      Protein G Agarose Resin

    • 库存

      大量

    • 供应商

      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

    • 规格

      5mL

    产品描述天然蛋白G(Protein G)是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白,与发现于金-黄|色葡萄{球菌}的细胞壁表面的蛋白A类似,主要通过与免疫球蛋白(Ig)的Fc区相互作用,结合大多数哺乳动物的IgG,可用于多种抗体(单抗和多抗)的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上,ProteinA 和Protein G结合性能不太一样,相比ProteinA,   ProteinG 对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力,它还可以结合不能与ProteinA很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1(详见附录1)。
    本品使用的是基因改造后的蛋白G,不仅维持其本身的Ig亲和特性,同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合,rProtein G Agarose Resin以琼脂糖凝胶为基质,重组Protein G为配基,具有很高的物理化学稳定性。利用本品经过一步亲和层析,即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体,使用方便,应用广泛。
    产品性质
    产品细节图片1
    基质(Matrix) 高度交联的4%琼脂糖微球
    配体(Ligand) 重组蛋白G
    孔径(Bead size) 45-165µm
    最大流速(Flowmax 0.MPa, bar
    储存缓冲液(Buffer) 20%乙醇的1×PBS
    载量(Capacity) 30mg human IgG/ml 基质
    pH范围(pH range) 3-10
     
    保存方法2~8℃保存,有效2年
    需准备试剂【注】建议以下缓冲液在使用前用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
    结合/洗杂缓冲液:0.15M NaCl, 20mM Na2HPO4, pH7.0
    洗脱缓冲液:0.1M甘氨酸,pH 3.0
    中和液:1M Tris-HCl,pH 8.5 
    使用方法【注】上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。

    1 rProtein G Agarose Resin的装填
    rProtein G Agarose Resin装入合适的层析柱中,注意避免产生气泡。
    2 样品纯化
    1)平衡:5倍柱体积的结合Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
    2)上样:将样品加到平衡好的rProtein G Agarose Resin中,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
    3)洗杂: 10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
    4)洗脱: 使用 5-10 倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
    5)清洗及保存:依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的 20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。
    3 SDS-PAGE检测
    将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。
    4 树脂清洗
    随着一些变性物质的沉淀和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量下降,影响柱子的性能,这时需对柱子进行清洗:
    1)去除沉淀或变性物质
     2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗;
     5倍柱体积的PBS,pH 7.4 清洗。
    2)去除由于疏水性吸附造成的非特异吸附物质
     3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™X-100清洗;
     5倍柱体积的PBS, pH 7.4 清洗。

    注意事项
    1. 请勿冷冻保存本产品。
    2. Protein G琼脂糖珠使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。
    3. 所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
    4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    5. 本产品仅作科研用途!
     附录1. 蛋白A,G对不同物种Ig的结合能力总表
    免疫球蛋白亚型 Protein A Protein G   免疫球蛋白亚型 Protein A Protein G  
    Human IgG ++++ ++++ Mouse IgG ++++ ++++
    Human IgG1 ++++ ++++ Mouse IgG1 + ++++
    Human IgG2 ++++ ++++ Mouse IgG2a ++++ ++++
    Human IgG3 + ++++ Mouse IgG2b +++ +++
    Human IgG4 ++++ ++++ Mouse IgG3 ++ +++
    Human IgM Use anti-Human IgM Mouse IgM Use anti-Mouse IgM
    Human IgE NR NR Chicken IgG (IgY) NR NR
    Human IgA + NR Cow IgG ++ ++++
    Human IgA1 + NR Goat IgG + ++++
    Human IgA2 + NR Goat IgG1 + ++++
    Human IgD Use anti-Human IgD Goat IgG2 ++++ ++++
    Rat IgG + ++ Goat IgM NR NR
    Rat IgG1 NR + Guinea Pig IgG ++++ ++
    Rat IgG2a NR ++++ Guinea Pig IgG1 ++++ ++
    Rat IgG2b NR + Guinea Pig IgG2 ++++ ++
    Rat IgG3 + ++ Hamster IgG + ++
    Sheep IgG + ++ Horse IgG + ++++
    Sheep IgG1 + ++ Rabbit IgG ++++ +++
    Sheep IgG2 + ++ Rabbit IgM NR NR
    Sheep IgM NR NR Rabbit All isotypes +++ ++
    Pig IgG +++ +++ Monkey IgG ++++ ++++
    Cat IgG ++++ + Donkey IgG

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    • 作者
    • 内容
    • 询问日期
    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    [1] Yang L, Gu W, Cheung KH, et al. InsP3R-SEC5 interaction on phagosomes modulates innate immunity to Candida albicans by promoting cytosolic Ca2+ elevation and TBK1 activity [published correction appears in BMC Biol. 2020 Nov 2;18(1):158]. BMC Biol. 2018;16(1):46. Published 2018 Apr 27. doi:10.1186/s12915-018-0507-6(IF:5.770)
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