- ￥388
- 翌圣生物（Yeasen）
- 20460ES25
- 上海
- 2025年10月29日
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- 英文名：
Q Agarose HP
- 保质期：
有效期5年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
4-30℃保存
- 规格：
25mL
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Q Agarose HP（Q强阴离子交换层析填料HP) | 20460ES25 | 25 mL | 400.00 |
| 20460ES60 | 100 mL | 1000.00 |
产品描述
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
本品Q强阴离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质，小颗粒设计，高分辨率，多应用样品的精细纯化。本品带电基团-N+(CH3)3。
产品性质
| 基质（Matrix） | 高度交联的6%琼脂糖微球 |
| 粒径（Bead size） | 25-45 µm |
| 离子交换类型（Type） | 强阴离子 |
| 载量（Capacity） | 0.14-0.20 mmol Cl-/mL 介质 |
| 流速（Flow Rate） | ≥150 cm/h |
| pH范围（pH Range） | 2-12（长期）/ 2-14（短期） |
| 储存缓冲液（Buffer） | 20%乙醇 |
运输和保存方法
冰袋运输。4-30℃保存，有效期5年。
使用方法
1 缓冲液的准备
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，下表为常用的阴离子交换缓冲液。
表1：阴离子交换缓冲液
| pH 范围 | 缓冲盐 | 浓度（mM） | 平衡离子 | pKa(25℃) |
| 4.3-5.3 | N-Methylpip-erazine | 20 | Cl- | 4.75 |
| 4.8-5.8 | Pip-erazine | 20 | Cl-或HCOO- | 5.33 |
| 5.5-6.5 | L-Histidine | 20 | Cl- | 6.04 |
| 6.0-7.0 | bis-Tris | 20 | Cl- | 6.48 |
| 6.2-7.2 | bis-Tris propane | 20 | Cl- | 6.65 |
| 7.3-8.3 | Triethanolamine | 20 | Cl-或CH3COO- | 7.76 |
| 7.6-8.6 | Tris | 20 | Cl- | 8.07 |
| 8.0-9.0 | N-Methyl-diethanolamine | 20 | SO42- | 8.52 |
| 8.0-9.0 | N-Methyl-diethanolamine | 50 | Cl-或CH3COO- | 8.52 |
| 8.4-9.4 | Diethanolamine | 50 | Cl- | 8.88 |
| 8.4-9.4 | Propane 1,3-Diamino | 20 | Cl- | 8.88 |
| 8.6-9.6 | bis-Tris propane | 20 | Cl- | 9.10 |
| 9.0-10.0 | Ethanolamine | 20 | Cl- | 9.50 |
| 9.2-10.2 | Pip-erazine | 20 | Cl- | 9.73 |
| 10.0-11.0 | Propane 1,3-Diamino | 20 | Cl- | 10.55 |
| 10.6-11.6 | Pip-eridine | 20 | Cl- | 11.12 |
2 样品准备
样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3 样品纯化
1）将介质装入合适的层析柱，层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
2）将样品加到平衡好的Q Agarose HP中（保证目的蛋白与填料充分接触，提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。
5）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。
4 填料清洗
离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。
CIP（Cleaning In Place）清洗
离子交换树脂可以重复使用而无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
1）去除一些沉淀或变性物质
用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
3）去除一些离子键结合物质
用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。
注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本产品仅作科研用途！
附表 问题及解决方案
| 问题 | 可能原因 | 推荐解决方案 |
| 柱子反压过高 | 填料被堵塞 | 按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。 |
| 样品中含有微小的固体颗粒，建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。 | ||
| 洗脱样品较杂 | 树脂重复多次使用 | 按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。 |
| 平衡不充分 | 增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂。 |
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单抗多为IgG，来源主要是腹水和混合瘤培养上清夜。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Protein G和ProteinA对IgG的Fc区有专一性亲和作用，能一步醇化各种不同源的IgG。血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理，在培养前除去IgG。重组蛋白A介质rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的栽量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose Hp或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。 疏水层析pheny
，来源主要是腹水和混合瘤培养上清夜。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Protein G和ProteinA对IgG的Fc区有专一性亲和作用，能一步醇化各种不同源的IgG。血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理，在培养前除去IgG。重组蛋白A介质rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的栽量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose Hp或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。 疏水层析pheny1 Sepharose HP
