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上海钰博
简 介:胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂可降低多种细胞常规维持和低密度贴壁所需的胎牛血清浓度。ITS以Earle平衡盐溶液(EBSS)配制。ITS-G和用于贴壁细胞培养的ITS-A适用于RPMI-1640等非复合培养基;ITS-X适用于含有丙酮酸钠的复合培养基,如F-12培养基或DMEM/F-12培养基。培养初期培养基中需加入2%-4%的胎牛血清,以便获得与含10%胎牛血清的同种培养基相同的细胞生长效果,经过适应后胎牛血清浓度可进一步降低。
保存条件:2℃至8℃
使用说明:用于细胞培养,不用于诊断和治疗
配制每升培养基,胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体1、LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体3、倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体4、保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。
H9 人T淋巴细胞系
K562 慢性骨髓性白血病细胞系
Wish 人羊膜细胞系
HL-60 早幼粒急性白血病细胞系
MOLT-4 淋巴母细胞性白血病细胞系
A431 表皮癌细胞系
L-02 人胎肝细胞系
Hut-102 人T淋巴瘤细胞系
MCF-7 人乳腺癌细胞系
ZR-75-30 人乳腺癌细胞系
PK-15 猪肾细胞系
IBRS-2 猪肾细胞系
ST 猪睾丸细胞系
Sf-21 昆虫细胞系
SF-9 昆虫细胞系
L8824 草鱼肝脏细胞
CIK 草鱼肾脏细胞
WCF 团头鲂尾鳍细胞
SCF 白鲢尾鳍细胞
SiHa 人宫颈鳞状细胞癌
Ski 人宫颈上皮细胞癌
SW626 人卵巢腺癌细胞
BI U-87 膀胱癌细胞
C6/36 蚊子细胞
ybZY-1 大鼠肾小球系膜细胞
AN3 CA 人子宫内膜腺癌细胞
H4 人脑神经胶质瘤细胞
HEC-1-B 人子宫膜腺癌细胞
MADB106 大鼠乳腺腺癌细胞系
yb-001 人口腔表皮样癌细胞
yb-002 人口腔上皮癌长春新碱耐药株
yb-003 人口腔癌细胞
yb-004 人喉表皮样癌细胞
按照培养基的成分来分 培养基按其所含成分,胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体按照培养基的物理状态分 培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体按照微生物的种类分 培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类胰岛素-转铁蛋白-硒-A添加剂(ITS-A),100×,液体.按照培养基用途分 培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基 。
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method:Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清,转换生长因子(TGF-β1)(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒(10ug/mL胰岛素,5ug/mL转铁蛋白,和0.5ng/mL亚硒酸盐)青霉素100U/Ml,链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
无血清培养基一些基本配方 1 、基本 适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞 葡萄糖 0.6% 谷氨酰胺 2mM NaHCO3 3mM Hepes 5mM 胰岛素 2.5mg/ml 转铁蛋白 100ng/ml 孕 酮 20nM 丁二胺 60mM 硒酸钠 30nM 青霉素 50mg/ml 链霉素 50mg/ml
受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。 2.成本较高。 3.针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。 无血清培养基一些配方 1.神经细胞,干细胞,PC12细胞 成份 终浓度 葡萄糖--0.6% 谷氨酰胺-2mM NaHCO3--3mM Hepes --5mM 胰岛素--2.5μg/ml 转铁蛋白 -100ng/ml 孕 酮 --20nM 丁二胺--60μM 硒酸钠--30nM 青霉素--50
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