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上海钰博
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基中已包含了高质量的血清和小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞所需生长因子,可直接用于小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞的培养。
注意事项:
1. 培养基为低温长途运输,收到后请先查看是否有漏液、破损或污染等,若出现问题请及时和我们联系。
2. 用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存。
A、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:
(1) 平板上有过多的水分;
(2) 划线时接种环未经反复灼烧。
(3) 多区划线,三区或四区划线。
B、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基涂布和倾注的区别:
涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
C、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基培养基配制时应注意的问题:
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
D、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
E、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基产品的保存:
(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
F、 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基观察时间的掌握:按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。
HepII 猴肾
COS-1 SV40转化的非洲绿猴肾
COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾
LLC-MK2 恒河猴肾
MLA-144 长臂猿淋巴瘤
B95-8 EBV转化的绒猴白细胞
NISE-Sacy-12 蓖麻蚕卵细胞
ZC-7901 草鱼吻端细胞
RF/6A 猴脉络膜-视网膜细胞(内皮)
Mv1Lu 貂肺上皮细胞
Pcc4 胚癌细胞
EL4 淋巴瘤
EL4IL-2 淋巴瘤
P815 肥大细胞瘤
YAC-1 淋巴瘤
MFC 前胃癌
L1210 淋巴白血病
AtT20 垂体瘤
P388D1 淋巴样瘤
NS-1 骨髓瘤
SP2/0 骨髓瘤
SRS-82 腹水瘤
P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤
SAC-IIB2 腹水瘤
SAC-IIC3 腹水瘤
45.6.TG1.7 骨髓瘤
S180 腹水瘤
P3-X63-Ag8 骨髓瘤
B16 黑色素瘤
J774A.1 单核细胞-巨噬细胞
C127 乳腺肿瘤
RAW264.7 单核细胞-巨噬细胞
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文献和实验)来免疫动物,可诱导体内产生针对关节软骨中的 Ⅱ 型胶原的自身免疫反应。 具体操作[7]:通过关节软骨主要构成蛋白 Ⅱ 型胶原蛋白(CⅡ)与完全弗氏佐剂等量混合制备成乳剂进行免疫诱导,初次免疫后 d26-d35 发病,小鼠出现关节肿胀、活动受限甚至会发生溃烂和变形的现象。常用高敏感品系 DBA/1 小鼠,发病率高,可重复性好但价格昂贵。另一种经济型低敏感品系 C57BL/6 小鼠对鸡 CⅡ 较敏感,对牛 CⅡ 胶原不敏感,可用鸡 CⅡ/CFA 乳化剂免疫产生关节炎。 模型特点:CIA 造模动物骨性改变
。 用ficoll或percoll不连续梯度离心法分离肺泡Ⅱ型上皮细胞。(2)滤膜分离法:肺泡Ⅱ型上皮细胞约10mm,比巨噬细胞(约25mm)和Ⅰ型细胞 (50mm-100mm)小,用150mm孔径的滤膜初滤除去大的组织碎片,30mm-40mm孔径的滤膜除去全部Ⅱ型细胞和部分巨噬细胞,采用 15mm的滤膜精滤。用滤膜分离操作简单,它和其他分离方法联合使用可以提高纯度。(3)流式细胞技术法:根据不同细胞之间的荧光差异,用荧光物质标记筛选。肺泡上皮细胞内含有丰富的脂类物质,用亲脂性荧光素标记,可以得到纯度很高的细胞
胎肾组织中的 SPs,目前这个方案只在小鼠 ESCs 验证过有效性和可行性。 图 1. 具有肾脏高阶结构的肾脏类器官培养方案示意图【3】 细胞来源 hiPSCs 培养试剂配方 UB谱系诱导 NP谱系诱导 近岸蛋白产品货号 hiPSCs培养基 hiPSCs分化培养基 Step 1培养基 Step 2培养基 Step 3培养基 Step 4培养基 Step 5培养基 Step 6培养基 Step 7培养基 分枝形成培养基
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