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- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海翌圣
- 20507ES
- 2026年02月02日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃保存
- 保质期：
有效期2年
- 英文名：
GSTSep Glutathione Agarose Resin
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
2mL(20507ES05)/10mL(20507ES10)/50mL(20507ES50)/100 mL(20507ES60)/1000mL(20507ES80)
| 规格： | 2mL(20507ES05) | 产品价格： | ￥1.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10mL(20507ES10) | 产品价格： | ￥928.00 |
| 规格： | 50mL(20507ES50) | 产品价格： | ￥3848.00 |
| 规格： | 100 mL(20507ES60) | 产品价格： | ￥6898.00 |
| 规格： | 1000mL(20507ES80) | 产品价格： | ￥48686.00 |
GSTSep Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以6%交联的琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载>20 mg GST融合蛋白。
此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。
产品信息
产品性质
储存条件
2~8℃保存，有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤除菌。
平衡/洗杂缓冲液：140 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，1.8 mM KH2PO4，pH 7.4
洗脱缓冲液：用平衡液配制10 mM 还原型谷胱甘肽（现配现用）
【注】平衡/洗杂缓冲液或洗脱缓冲液中可加入1-10 mM DTT。
使用说明
【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。
1. 样品纯化
1）装柱：将GSTSep Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的平衡Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的平衡Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。
2. SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。
3. 填料清洗
GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6 M盐酸胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。
注意事项
1.请勿冷冻保存本产品。
2.GSTSep Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3.所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4.本产品仅作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表 问题及解决方案
Ver.CN20230921
此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。
产品信息
| 货号 | 20507ES10/20507ES50/20507ES60/20507ES80 |
| 规格 | 10 mL /50 mL /100 mL/1000 mL |
产品性质
| 基质（Matrix） | 6%交联的琼脂糖微球 |
| 配体（Ligand） | 通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽 |
| 粒径（Bead size） | 45-165 µm |
| 载量（Capacity） | >20 mg GST蛋白（40 kDa）/mL基质 |
| 最大压力（PressureMax） | 0.1 MPa，1 bar |
| pH稳定范围（pH range） | 3-12 |
| 储存缓冲液（Buffer） | 含20%乙醇的1×PBS |
储存条件
2~8℃保存，有效期2年。
需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤除菌。
平衡/洗杂缓冲液：140 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，1.8 mM KH2PO4，pH 7.4
洗脱缓冲液：用平衡液配制10 mM 还原型谷胱甘肽（现配现用）
【注】平衡/洗杂缓冲液或洗脱缓冲液中可加入1-10 mM DTT。
使用说明
【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。
1. 样品纯化
1）装柱：将GSTSep Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的平衡Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的平衡Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。
2. SDS-PAGE检测
将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。
3. 填料清洗
GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6 M盐酸胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH 7.4清洗。
注意事项
1.请勿冷冻保存本产品。
2.GSTSep Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3.所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4.本产品仅作科研用途。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表 问题及解决方案
| 问题 | 可能原因 | 推荐解决方案 |
| 柱子反压过高 |
填料被堵塞 |
清洗树脂 |
| 裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，或离心去除 | ||
| 样品太黏稠 | 样品中含高浓度的核酸，延长破碎时间直至粘度降低，或添加DNaseI （终浓度为5 µg/mL），Mg2+（终浓度1 mM），冰上孵育10-15 min | |
| 缓冲液太黏稠 | 有机试剂或蛋白稳定试剂（如甘油等）可能会引起反压增高，降低操作流速 | |
| 洗脱组分中无目的蛋白 |
GST标签蛋白变性了 | 使用温和的裂解条件，实验条件以经验为准 |
| 过度的裂解使目的蛋白变性 | ||
| 目的蛋白聚集产生沉淀 | 在细胞裂解前溶液中加入DTT，终浓度为1-10 mM | |
| 融合蛋白改变了GST的构象，影响了目的蛋白的结合力 | 测定pGEX中GST的结合力，对载体进行超声处理，检测其结合力。如果载体中GST有很高的亲和力，有可能是改变融合蛋白的构象从而降低了GST标签蛋白的亲和力 | |
| 降低结合温度至4℃，充分清洗 | ||
| 柱子平衡时间太短，目的蛋白不是在pH 6.5-pH 8.0范围内结合 | 用pH 6.5-pH 8.0的buffer进行充分的平衡，如PBS | |
| 目的蛋白没有完全洗脱下来 |
洗脱体积太少 | 增加洗脱液体积，减小洗脱流速。 |
| 洗脱液中谷胱甘肽浓度太低 | 增加洗脱液中还原型谷胱甘肽浓度，可尝试用20-40 mM还原型谷胱甘肽洗脱。 | |
| 低pH影响洗脱 | 在不增加洗脱液中谷胱甘肽量时，提高洗脱液中pH至pH 8-9会有改善 | |
| 增加洗脱液中离子强度，如0.1-0.2 M NaCl | ||
| 洗脱液中谷胱甘肽被氧化 | 使用新鲜配制的洗脱液 | |
| 加入DTT | ||
| 非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱 | 洗脱液中加入非离子型洗涤剂，如0.1%的Triton X-100或者2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷Tween-20 | |
| 电泳或Western Blot检测中发现多条带 |
Mr 70000蛋白与目的蛋白一起纯化下来 | Mr 70000蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK的产物，可以在目的蛋白中加入50 mM Tris-HCl，2 mM ATP，10 mM MgSO4，pH 7.4在37℃加热10min去除 |
| 可通过ATP-琼脂糖胶或离子交换来去除目的蛋白溶液中的dnaK蛋白 | ||
| GST融合蛋白已经发生降解 | 在裂解液中加入蛋白酶抑制剂，如加入1 mM PMSF | |
| 可能是蛋白酶对目的蛋白部分降解造成的，可使用蛋白酶缺陷型宿主菌（如lon-或ompT） | ||
| 细胞破碎过度 | 减少细胞破碎时间，超声前加入溶菌酶（菌液体积的0.1倍10 mg/mL溶菌酶，25 mM Tris-HCl，pH 8.0），避免发泡导致蛋白酶变性，过度超声破碎增加宿主内源蛋白与GST融合目的蛋白的共纯化。 | |
| 共价共纯化 | 包括促进蛋白正确折叠的分子伴侣的共纯化，如：DnaK（Mr～70000），DnaJ（Mr～37000），GrpE（Mr～40000），GroEL（Mr～57000），GroES（Mr～10000） | |
| 抗体与E. coli的各种蛋 白反应 |
抗体吸附E. coli蛋白：GST-抗体；超声处理去除GST抗体，可以用Western Blot检测 |
Ver.CN20230921
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文献和实验该产品被引用文献
[1] Chen X, Duan Y, Qiao F, et al. A secreted fungal effector suppresses rice immunity through host histone hypoacetylation [published online ahead of print, 2022 May 20]. New Phytol. 2022;10.1111/nph.18265. doi:10.1111/nph.18265(IF:10.152)
[2] Jin Y, Pan Y, Zheng S, et al. Inactivation of EGLN3 hydroxylase facilitates Erk3 degradation via autophagy and impedes lung cancer growth. Oncogene. 2022;41(12):1752-1766. doi:10.1038/s41388-022-02203-2(IF:9.867)
[3] Yuan D, Li S, Shang Z, et al. Genus-level evolutionary relationships of FAR proteins reflect the diversity of lifestyles of free-living and parasitic nematodes. BMC Biol. 2021;19(1):178. Published 2021 Aug 30. doi:10.1186/s12915-021-01111-3(IF:7.431)
[4] Ma X, Yuan Y, Li C, et al. Brassinosteroids suppress ethylene-induced fruitlet abscission through LcBZR1/2-mediated transcriptional repression of LcACS1/4 and LcACO2/3 in litchi. Hortic Res. 2021;8(1):105. Published 2021 May 1. doi:10.1038/s41438-021-00540-z(IF:6.793)
[5] Yi JW, Wang Y, Ma XS, et al. LcERF2 modulates cell wall metabolism by directly targeting a UDP-glucose-4-epimerase gene to regulate pedicel development and fruit abscission of litchi. Plant J. 2021;106(3):801-816. doi:10.1111/tpj.15201(IF:6.486)
[6] Ma X, Yuan Y, Wu Q, Wang J, Li J, Zhao M. LcEIL2/3 are involved in fruitlet abscission via activating genes related to ethylene biosynthesis and cell wall remodeling in litchi. Plant J. 2020;103(4):1338-1350. doi:10.1111/tpj.14804(IF:6.141)
[7] Ma X, Ying P, He Z, Wu H, Li J, Zhao M. The LcKNAT1-LcEIL2/3 Regulatory Module Is Involved in Fruitlet Abscission in Litchi. Front Plant Sci. 2022;12:802016. Published 2022 Jan 21. doi:10.3389/fpls.2021.802016(IF:5.754)
[8] Ma X, Li C, Yuan Y, Zhao M, Li J. Xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase genes LcXTH4/7/19 are involved in fruitlet abscission and are activated by LcEIL2/3 in litchi. Physiol Plant. 2021;173(3):1136-1146. doi:10.1111/ppl.13509(IF:4.500)
[9] Li C, Ma X, Huang X, et al. Involvement of HD-ZIP I transcription factors LcHB2 and LcHB3 in fruitlet abscission by promoting transcription of genes related to the biosynthesis of ethylene and ABA in litchi [published correction appears in Tree Physiol. 2019 Dec 1;39(12):2071]. Tree Physiol. 2019;39(9):1600-1613. doi:10.1093/treephys/tpz071(IF:3.477)
[2] Jin Y, Pan Y, Zheng S, et al. Inactivation of EGLN3 hydroxylase facilitates Erk3 degradation via autophagy and impedes lung cancer growth. Oncogene. 2022;41(12):1752-1766. doi:10.1038/s41388-022-02203-2(IF:9.867)
[3] Yuan D, Li S, Shang Z, et al. Genus-level evolutionary relationships of FAR proteins reflect the diversity of lifestyles of free-living and parasitic nematodes. BMC Biol. 2021;19(1):178. Published 2021 Aug 30. doi:10.1186/s12915-021-01111-3(IF:7.431)
[4] Ma X, Yuan Y, Li C, et al. Brassinosteroids suppress ethylene-induced fruitlet abscission through LcBZR1/2-mediated transcriptional repression of LcACS1/4 and LcACO2/3 in litchi. Hortic Res. 2021;8(1):105. Published 2021 May 1. doi:10.1038/s41438-021-00540-z(IF:6.793)
[5] Yi JW, Wang Y, Ma XS, et al. LcERF2 modulates cell wall metabolism by directly targeting a UDP-glucose-4-epimerase gene to regulate pedicel development and fruit abscission of litchi. Plant J. 2021;106(3):801-816. doi:10.1111/tpj.15201(IF:6.486)
[6] Ma X, Yuan Y, Wu Q, Wang J, Li J, Zhao M. LcEIL2/3 are involved in fruitlet abscission via activating genes related to ethylene biosynthesis and cell wall remodeling in litchi. Plant J. 2020;103(4):1338-1350. doi:10.1111/tpj.14804(IF:6.141)
[7] Ma X, Ying P, He Z, Wu H, Li J, Zhao M. The LcKNAT1-LcEIL2/3 Regulatory Module Is Involved in Fruitlet Abscission in Litchi. Front Plant Sci. 2022;12:802016. Published 2022 Jan 21. doi:10.3389/fpls.2021.802016(IF:5.754)
[8] Ma X, Li C, Yuan Y, Zhao M, Li J. Xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase genes LcXTH4/7/19 are involved in fruitlet abscission and are activated by LcEIL2/3 in litchi. Physiol Plant. 2021;173(3):1136-1146. doi:10.1111/ppl.13509(IF:4.500)
[9] Li C, Ma X, Huang X, et al. Involvement of HD-ZIP I transcription factors LcHB2 and LcHB3 in fruitlet abscission by promoting transcription of genes related to the biosynthesis of ethylene and ABA in litchi [published correction appears in Tree Physiol. 2019 Dec 1;39(12):2071]. Tree Physiol. 2019;39(9):1600-1613. doi:10.1093/treephys/tpz071(IF:3.477)
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个碳原子的间隔臂共价偶联到 4% 交联的琼脂糖上组成。每毫升树脂可以结合大约 8 mg GST 标签蛋白。树脂浸在 20% 的乙醇中。谷胱甘肽树脂有单独的树脂也有试剂盒形式提供。除了用于洗脱的还原性谷胱甘肽之外，结合/冲洗和洗脱缓冲液也有提供。 产品特点： 用于纯化 GST 蛋白 高载量，8 mg/ml 配基密度，7-15μmoles 谷胱甘肽/ml 树脂尺寸，50-160μm 树脂结构，4% 交联的琼脂糖 10 个碳原子的间隔臂 「名剑」-蛋白亲和纯化
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文献支持
谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于蛋白GST标签纯化) [可申请试用]
￥1 - 48686
