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文献和实验] 。在上述基础上,我们进一步优化了分离方法,并将其用于本实验室大规模的叶绿体分离和蛋白质组分析工作中 [16] 。这种方法没有进行过叶绿体蛋白质输入活性的测试,但是本方法具有产率高,污染低的优点,尤其适合于叶绿体的蛋白质组分析。关于用于体外蛋白质输入活性试验的叶绿体分离方法,可以参考其他的一些报道 [17] 。2. 材料 ( 1 ) 介质 A ( 匀浆缓冲液,见注释 1):50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L 山梨醇、2 mmol/L EDTA
性是明显的(图 4)。Scale S 方法改进了传统的配方,增加了山梨醇。山梨醇对脑的透明化更佳,尿素有水合作用,使组织膨胀,但山梨醇有脱水作用,让组织缩小,通过配比可以保留样本的原本体积。优点:操作简单,配置溶液每天更新即可。缺点:脑组织膨胀率 10%-30% 不等,影响组织原本状态,有可能破坏组织内原本结构。孵育时间长,溶液消耗大。图 4:经 ScaleA2 孵育后的组织图 5: 共聚焦成像4. BABBBABB 是使用有机溶剂如苯甲醇/苯甲酸苄酯去除脂质,从而得到透明的组织的方法。有机
基 + 0.004%组氨酸) 在1000ml的MGY培养基中加入10ml的100*H母液混匀,4℃保存,保存期为2个月。2.7 RD Regeneration Dextrose Medium (葡萄糖再生培养基) (含有:1mol/L的山梨醇;2%葡萄糖;1.34%YNB;4*10-5%生物素;0.005%氨基酸) 1. 将186g的山梨醇定容至700ml,高压灭菌; 2. 冷却后于45℃水浴; 3. 将100ml的10*D、100ml的10*YNB;2ml的500*B;10ml的100*AA等母液
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