重组肠激酶（rEK）

NusA技术：显著增强大肠杆菌表达可溶、活性蛋白

的IL-29对细胞的保护效应来检测其抗病毒活性。 ■    人干扰素-λ2（Li 2007）——酶切后，用Novagen提供的EKaptureTM琼脂除去重组的肠激酶。先用纯化后的干扰素-λ2处理WISH细胞，24小时后加入VSV病毒，可以观察到干扰素-λ2可以有效地保护细胞免于病毒介导的病变。 表2. 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白 参考

[资源][原创] 蛋白标签纯化技术——CBP（钙调蛋白结合肽）

缓冲液中能够特异性的被钙调蛋白树脂捕捉吸附，并且在中性环境中能够被2 mM EGTA洗脱，这与6组氨酸亲合标签纯化体系相比反应条件要温和许多。仅有4-kDa 大小的CBP tag 与26-kDa GST 标签相比对蛋白分子的影响非常小。在所表达的蛋白分子上包含一个凝血酶或肠激酶列解位点，依靠它可以非常方便的移除CBP标签。在哺乳动物细胞中表达的标签纯化系统(两步纯化法用于高纯度的要求)Mammalian TAP System本系统同时用到了streptavidin binding peptide

【原创】蛋白质纯化武器—工艺篇（欢迎补充）

重组药用蛋白要求，SDS-PAGE纯度大于95%，HPLC纯度大于95%，Western Blott单一条带，去除内毒素。 3、纯化设计分析 此为一典型的小分子蛋白融合表达实例。 由于有his6-tag融合可溶表达，可以采用Ni柱来进行初步纯化。 融合蛋白的理论等电点为5.9，可以考虑用Q柱、DEAE柱来吸附纯化。 融合蛋白需要酶切去除融合片断，要做肠激酶酶切工艺。 蛋白A的理论等电点为9.7，可以考虑用SP柱来吸附纯化。 酶切后的蛋白纯化可利用his-tag和pI的差异