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- 2025年07月15日
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100
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上海远慕生物科技
- 规格：
250g
货号：YM-BG01002
保质期： 24个月
供应茜素-β-半乳糖苷琼脂【培养基配制】
先计算所需培养基之份量 (体积)，依已商品化培养基产品上之指示称取所需克数，并加入蒸馏水。
1）搅拌均匀后，于微波炉中加热数分钟将所有成份溶解后
2）利用分注器进行分装(切勿锁紧盖子！)。接著放入杀菌釜中进行灭菌工作
3）若是配制slant 则需于灭完菌后趁 培养基未凝固前锁上盖子并斜放 (可用厚书辅助)；若是配置broth或deep agar 可等其冷却后再锁紧盖子，并放入4℃冰箱中保存备用。
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供应茜素-β-半乳糖苷琼脂【培养基种类与基本成分】
1）氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
2）碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
3）培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠、钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素，细胞通常可耐受260mOsm/kg 320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。
4）大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但是，细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7)，而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或空气中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3的加入量为1.97g/L；如果CO2浓度维持在10%，培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。 HEPES 是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。
5）在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
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文献和实验一种能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。 EC3． 2． 1． 23。一般是指能将β -半乳糖苷水解为半乳糖和糖苷的酶。很早以来，就被认为是大肠杆菌诱导酶的典型。分子量 54万，为四聚体。其结构基因为 LacZ，与 LacY（半乳糖苷透性酶）和 LacA（半乳糖苷转乙酰酶）同组成乳糖操纵子，并在特异的乳糖操纵系统中的阻遏物、操纵基因、启动子等的协同下，支配调节β -半乳糖苷酶的合成。当培养基中无诱导物质时，每一细胞中虽然没有几个分子的β -半乳糖苷酶；但一旦被诱导，则每一
邻硝基苯-β-吡喃半乳糖苷 O－nitrophenyl－β－D－galactopyranoside
缩写为 ONPG。是广泛利用于β -半乳糖苷酶活力测定的底物。水解后可游离出邻硝基酚，由于邻硝基酚在碱性条件下呈黄色（ 420毫微米光吸收），所以容易进行比色定量。另外利用这种性质，还可用于分离各种代谢调节突变株。
酵母 β －半乳糖苷酶的测定 1） 粗提取物测定 1． 在适当温度下（通常 30 ℃），用适当培养液将 5ml 细胞培养物培养到浓度为 1 × 107 ～ 2 × 107 细胞 /ml 。如果自主复制质粒的杂合基因表达，可使用一种适当培养基对存在质粒的菌株进行筛选。 2． 在冰上冷却细胞，离心收集。注意：以下步骤保持细胞在冰上。 3． 弃上清液，将细胞悬浮于 250 μ
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