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- 2026年01月21日
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- 文献和实验
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- 保存条件：
贮存于-20°C (含 50% 甘油）
- 英文名：
DpnII
- 库存：
大量
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识别位点 在不同反应缓冲液中的活性
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文献和实验is first reduced. I routinely accomplish this by restriction enzyme digestion (usually DpnII, though other 4-cutters work as well). After digestion, the DNA should be cleaned up by phenol/chloroform extraction / EtOH precipitation (Qiagen PCR purification kit
的量多100 倍以上,为此Brenner 等设计了1167×107 个片段长32mer 的寡核苷酸,这样足可以保证生物体所有不同的cDNA 模板都能与不同的寡核苷酸相连接,而且每一个的微球体上也可承载104 ～105 个相同的cDNA 拷贝。 2. 用DpnII 酶切处理微球体上的cDNA 模板,形成粘性末端。 3. 用含有II 型限制性内切酶Bbv1 识别位点的不同寡核苷酸接头与连接在微球体上的cDNA 模板相连接,另外每一种接头的3’端还带有一个荧光标记,可与荧光探针杂交,产生
和未杂交上的对照组成分（cDNA或mRNA），得到实验组独有的cDNA或mRNA，这些基因即为差异表达基因。为克服传统的消减杂交法的不足，新的消减杂交技术应运而生。4.1 代表性差异分析技术（RDA） 原理是首先用DpnⅡ或Sau3AI酶切两组双链cDNA，两端接上单链接头R，补平后，用含接头R序列的引物扩增，再用DpnII或Sau3AI去除双链cDNA两端的接头R；只给予实验组双链cDNA两端再接上单链接头J。将实验组与驱动组cDNA杂交，杂交反应体系中只有实验组自身杂交形成的双链cDNA才两端
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