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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名:
Mouse anti- BSA
- 应用范围:
,
- 宿主:
mouse
- 抗原来源:
mouse
- 保质期:
3年
- 级别:
亲和纯
- 库存:
大量
- 供应商:
佰泰科
- 适应物种:
,
- 是否单克隆:
多克隆
- 保存条件:
-20
- 规格:
1mg/ml
|
Mab mouse×bovine
ELISA,CLIA
IgG1
Clone:2B030B01 Affinity Purified Save;-20℃ Specificity: Reacts only with BSA. 单克隆抗体,鼠抗牛,应用于ELISA、CLIA实验。
IgG1 亚型,克隆号:2B030B01 亲和纯化,-20℃保存。 特异性:只对牛血清白蛋白有反应。 |
提纯实验
1.材料
单克隆抗体制备流程
(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
20mMol/LNaCl
(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
40mMol/LNaCl
(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
80mMol/LNaCl
(4)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
(5)饱和硫酸铵液
(6)DEAE—纤维素柱
2.操作方法
(1)小鼠腹水用冷PBS液稀释4倍后,于1.00×105转离心30min,去沉淀。
(2)在4℃于上清中缓缓滴加饱和硫酸铵液,边加边搅拌,使溶液最终为50%硫酸铵浓度。
(3)此溶液置冰中30min~60min,然后5000r/min离心10min,去上清。
(4)将沉淀溶于Tris-HCl缓冲液(40mMol/LNaCl)中(溶液可能混浊)。
(5)装入透析袋于Tris-HCl缓冲液(20mMol/LNaCl)中透析除盐。
(6)离心去沉淀。
单克隆抗体制备流程
(7)溶液稀释(1:100或更高倍稀释)后,于280nm测蛋白含量,估计蛋白质含量1A280unit=0.8mg蛋白质一般每ml腹水中,含有总蛋白约25mg~36mg。
(8)过DEAE—纤维素柱:纤维素柱高40cm,以20mMol/LNaClTris缓冲液平衡。透析样品以Tris缓冲液等量稀释。
样品进入柱床速度为1ml~2ml/min,以NaCl线形梯度洗脱。大部分单克隆IgG于40mMol/L和80mMol/LNaCl洗脱,也有极少例外的单克隆抗体于120mMol/L~150mMol/LNaCl洗脱。测OD280nm收集蛋白峰,单克隆IgG保存备用。
杂交瘤产生各种免疫球蛋白,但主要是IgG和IgM,究竟是哪种为主,则决定于抗原的免疫程序。免疫一次,且3天后就取脾,多为产生IgM的B淋巴细胞。免疫多次的多为IgG。
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文献和实验相关专题 牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot 中作为Blocking agent。 用途 1、用于生化研究、遗传工程和医药研究 2、用作医药保健食品、调味品 3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用
如何选择合适的牛血清白蛋白(BSA)? 由于牛血清白蛋白(BSA)具有多种产品样式,可满足不同种的应用。目前网上的信息大多模棱两可,有牛血清白蛋白,也有牛血清白蛋白v组分等,很多 供货商对其区别也是不清楚的;另外,市场上还提供无蛋白酶、无DNase及无RNase、无脂肪酸、微生物级、试剂级、诊断分析级等不同等BSA粉末,因 此如何选择合适的BSA产品是很重要的前提。一般来说,普通
由于牛血清白蛋白(BSA)具有多种产品样式,可满足不同种的应用。目前网上的信息大多模棱两可,有牛血清白蛋白,也有牛血清白蛋白v组分等,很多 供货商对其区别也是不清楚的;另外,市场上还提供无蛋白酶、无DNase及无RNase、无脂肪酸、微生物级、试剂级、诊断分析级等不同等BSA粉末,因 此如何选择合适的BSA产品是很重要的前提。一般来说,普通的BSA粉末或者第五组分适合于细胞和组织培养,也可以用于一些蛋白补充物;而其它无蛋白酶、 无DNase及无RNase、无脂肪酸等处理的BSA则适合于更多
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