暗盒

如何做好 Southern 杂交？

性检测仪探测膜上的放射强度。实践证明，当放射强度指示数值较环境背景高 1~2 倍时，是洗膜的终止点。上述洗膜过程无论在哪一步达到终点，都必须停止洗膜。洗完的膜浸入 2× SSC 中 2 min，取出膜，用滤纸吸干膜表面的水份，并用保鲜膜包裹，注意保鲜膜与 NC 膜之间不能有气泡。将膜正面向上，放入暗盒中（加双侧增感屏），在暗室的红光下，贴覆两张 X 光片，每一片都用透明胶带固定，合上暗盒，置 -70 ℃ 低温冰箱中曝光。根据信号强弱决定曝光时间，一般在 1-3 天时间。洗片时，先洗一张 X 光片，若感光偏

组织切片的原位杂交细胞化学方法

（Dipping）过核乳胶膜的载片放入暗盒内，事先最好将暗盒准备好，为保持干燥，放入一包变色硅胶干燥剂（无水干燥剂为小块蓝色晶体，吸水后呈粉红色，置烤箱中烘干待转成蓝色后可重复应用），预先备好封固暗盒用的胶带备用。 　　②核乳胶液，国外产品为ILFord K5乳胶液，国内核乳胶产品可自原子能研究所订购。不论国产或进口乳胶，事先应（按说明需要浓度）稀释分装在10ml小瓶内，密封于暗盒内，4℃备用。反复的冷冻和融解核乳胶会增加背景染色。每一小瓶供一次性实验应用。 　　为节省核乳胶

RNA印迹杂交

漂洗后，把杂交膜放在一张3MM 滤纸 上稍晾干后，将潮湿的滤膜封在塑料袋内或用塑料薄膜包裹。 15． 滤膜放射自显影：将杂交膜（包裹在塑料袋内，RNA面朝上）放在X射线暗盒底部， 胶片 放在其上。为方便起见，可将增感屏固定在暗盒盖上，关闭暗盒，在－70℃曝光1天～2周。 16． 将暗盒从冰箱内移出时，应有足够的时间（30min～1h）使其温度调至平衡。在暗室将 胶片 从暗盒取出，并在自动X线底片处理仪上冲