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- 文献和实验
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大量
- 供应商:
Solarbio
- 现货状态:
现货
- 保修期:
30天
- 规格:
8*10
品牌:Solarbio | 货号:YA0861
单位 : 盒
产品简介
暗盒是一种在避光条件下进行信号收集的工具,在暗室中操作,将胶片压入暗盒,能很好的固定膜和胶片的相对位置。让膜上的信号很好的反映在胶片上。是暗室曝光(western)中很好的帮手。
使用方法
第一步,信号源(膜)的放置:将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置,将一层透明薄膜覆盖在膜上;
第二步,调试适当的红外光强度,将暗室中其它的灯光关闭,使暗室中只存在红外光,在红外光的条件下取出胶片,裁剪合适大小,做好标示,正压在膜上,然后盖上暗盒,计时。
第三步,取出暗盒中的胶片进行显影等操作。
注意事项
1,保持暗盒表面和内部的干净整洁,因为污物有可能会有荧光信号,对结果造成不利影响。
2,暗盒的使用时注意白光和红外光的分段,在压胶片收集信号时,暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射
Western blotting实验相关试剂:
SDS-PAGE电泳:
蛋白胶配置:
P1200 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
A1010 30%(29:1)制胶液
T1020 1M Tris-HCL (PH6.8)
T1010 1.5M Tris-HCL (PH8.8) (T8060 TRIS)
A1030 10%PAGE胶凝固剂[AP,APS]
S1010 10%SDS (S8010 SDS)
T8090 TEMED(PAGE胶促凝剂)
A1025 40%(37.5:1)制胶液
S1051 4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液(PH=8.8)
S1052 4×SDS-PAGE 浓缩胶缓冲液(PH=6.8)
D1070 1M DTT(D8220 DTT)
蛋白预制胶
PG00810-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度8%
PG01010-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度10%
PG01210-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度12%
PG01510-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度15%
PG41510-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度4-15%
PG42010-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 浓度4-20%
PG01215-S Precast-Gel变性蛋白预制胶 12%, 15孔
PG41515-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度4-15% 15孔
PG42010-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度4-20%
PG41510-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度4-15%
PG01010-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度10%
PG01210-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度12%
PG01510-N Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度15%
蛋白电泳:
PR1300 超低分子量蛋白Marker
PR1400 低分子量蛋白Marker
PR1500 次高分子量蛋白Marker
PR1600 预染低分子量蛋白Marker
PR1700 预染次高分子量蛋白Marker
PR1800 Western blotting 蛋白Marker
PR1910 彩虹180广谱蛋白Marker(11-180KD)
PR1920 彩虹245广谱蛋白Marker (11-245KD)
PR1930 彩虹245plus广谱蛋白Marker(5-245KD)
PR1950 彩虹130广谱蛋白marker(15-130KD)
P1015 4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
P1016 4×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇)
P1017 4×非变性蛋白上样缓冲液
P1018 2×蛋白上样缓冲液(含DTT)
P1019 2×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)(B8120 溴酚蓝 G8190 甘油 S8270 蔗糖)
M8210β-巯基还原剂
T1070 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(G8200 甘氨酸)
P1300-500 考马斯亮蓝快速染色液(C8420 考马斯亮蓝G-250、C8430 考马斯亮蓝R-250)
P1305 考马斯亮蓝染色套装(染色液+脱色液)
R8070 剥离硅烷
B8150 亲和硅烷
转膜:
印记膜:尼龙膜、PVDF 膜、硝酸纤维素膜(NC 膜)
YA1711 硝酸纤维素膜NC膜(0.45um)
YA1701 PVDF膜(0.45um)13.25*15cm
3030 3MM 滤纸
P0012 10×丽春红(P8330 丽春红S)
D1060 10×电泳转移缓冲液
封闭、抗体孵育:
T1080-500 20*TBS
T1081-500 10*TBST
T1085-500 1*TBST(T8220 吐温 -20)
SW3010 膜封闭液
SW3015 5%BSA 封闭液(A8010、A8020、126575 牛血清白蛋白BSA)
D8340 脱脂奶粉
C8200 酪蛋白
SW3020 膜再生液
抗体:一抗、二抗
SE 系列 HRP 标记二抗、SF 系列FITC 标记二抗
SH1 酶标记亲和素HRP 、SHB2 生物素化羊抗人IgG
A1800 抗体稀释液(普通型)
A1810 一抗稀释液
A1820 HRP 标记抗体稀释液
A1830 AP 标记抗体稀释液
A1840 荧光抗体稀释液
Western信号检测:
PR1100 BCIP/NBT 地物显色试剂盒(B8090 BCIP、N8140 NBT)
A2010 AEC 显色试剂盒(20×)(A5754 AEC)
DA1010 DAB 显色试剂盒(20×)(D8230 DAB-4HCL)
PE0010 ECL Plus超敏发光液
PE0020 West Pico ECL超敏发光液
PE0030 West Femto ECL超敏发光液
SW1010 Western blotting(小鼠IgG)DAB 法显色试剂盒
SW1020 Western blotting(兔IgG)DAB 法显色试剂盒
SW1030 Western blotting(山羊IgG)DAB 法显色试剂盒
SW1040 Western blotting(小鼠/兔IgG)DAB 法显色试剂盒
SW2010 Western blotting(小鼠IgG)ECL 化学发光法检测试剂盒
SW2020 Western blotting(兔IgG)ECL 化学发光法检测试剂盒
SW2030 Western blotting(山羊IgG)ECL 化学发光法检测试剂盒
SW2040 Western blotting(小鼠/兔IgG)ECL 化学发光法检测试剂盒
YA0370 显影粉
YA0380 定影粉
YA0381 柯达定影液
YA0371 柯达显影液
YA0860 暗盒 5*7
YA0870 高速增感屏 5*7
YA0360 胶片 5*7
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文献和实验性检测仪探测膜上的放射强度。实践证明,当放射强度指示数值较环境背景高 1~2 倍时,是洗膜的终止点。上述洗膜过程无论在哪一步达到终点,都必须停止洗膜。洗完的膜浸入 2× SSC 中 2 min,取出膜,用滤纸吸干膜表面的水份,并用保鲜膜包裹,注意保鲜膜与 NC 膜之间不能有气泡。将膜正面向上,放入暗盒中(加双侧增感屏),在暗室的红光下,贴覆两张 X 光片,每一片都用透明胶带固定,合上暗盒,置 -70 ℃ 低温冰箱中曝光。根据信号强弱决定曝光时间,一般在 1-3 天时间。洗片时,先洗一张 X 光片,若感光偏
(Dipping)过核乳胶膜的载片放入暗盒内,事先最好将暗盒准备好,为保持干燥,放入一包变色硅胶干燥剂(无水干燥剂为小块蓝色晶体,吸水后呈粉红色,置烤箱中烘干待转成蓝色后可重复应用),预先备好封固暗盒用的胶带备用。 ②核乳胶液,国外产品为ILFord K5乳胶液,国内核乳胶产品可自原子能研究所订购。不论国产或进口乳胶,事先应(按说明需要浓度)稀释分装在10ml小瓶内,密封于暗盒内,4℃备用。反复的冷冻和融解核乳胶会增加背景染色。每一小瓶供一次性实验应用。 为节省核乳胶
漂洗后,把杂交膜放在一张3MM 滤纸 上稍晾干后,将潮湿的滤膜封在塑料袋内或用塑料薄膜包裹。 15. 滤膜放射自显影:将杂交膜(包裹在塑料袋内,RNA面朝上)放在X射线暗盒底部, 胶片 放在其上。为方便起见,可将增感屏固定在暗盒盖上,关闭暗盒,在-70℃曝光1天~2周。 16. 将暗盒从冰箱内移出时,应有足够的时间(30min~1h)使其温度调至平衡。在暗室将 胶片 从暗盒取出,并在自动X线底片处理仪上冲
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